Velocidad de congelacion

Proceedings V World Avocado Congress (Actas V Congreso Mundial del Aguacate) 2003. pp. 89-95.

EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA DE AGUACATE (PERSEA AMERICANA MILL. CV. HASS)
I. Vidales-Fernández1, R. Salgado-Garciglia2, M.A. Gómez-Lim3, E. Ángel-Palomares2 y H. Guillén-Andrade1.
Nacional de Investigaciones Forestales y Agropecuarias, Campo Experimental Uruapan, Ave. Latinoamericana 1101, Col.Revolución, CP 60150, Uruapan, Mich., México. cefapuru@prodigy.net.mx; Instituto de Investigaciones Químico-Biológicas, Facultad de Agrobiología, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, Ciudad Universitaria, CP 58030, Morelia, Mich., México. rsalgado@zeus.umich.mx; Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del Instituto Politécnico Nacional, Unidad de Biotecnología e Ingeniería Genética dePlantas. Apartado postal 629. Irapuato, Gto. México. mgomez@ira.cinvestav.mx
3 2 1Instituto

RESUMEN
El cultivo in vitro de tejido nucelar de aguacate (Persea americana Mill. cv. Hass) y la subsecuente inducción de la embriogénesis somática fue desarrollada. Segmentos de tejido nucelar fueron colocados sobre un medio de cultivo con sales minerales MS, auxinas (picloram, AIB y 2,4-D) ysuplementado con caseína hidrolizada. Ácido ascórbico y L-cisteína fueron probados para reducir necrosis en obscuridad y con baja intensidad de luz. La necrosis se redujo en un 100% con la inmersión del tejido nucelar en ácido ascórbico (400 mg/l) antes del cultivo in vitro. Un 20% de callo embriogénico desarrollo sobre medio de inducción con 2,4-D (1 mg/l) después de 50 días a 25oC en obscuridad. Sinembargo, los callos embriogénicos desarrollaron mejor en un medio adicionado con picloram (4 mg/l) y AIB (0.4 mg/l). La multiplicación del callo embriogénico fue obtenida en baja intensidad de luz y cultivado sobre medio sin reguladores por 4 semanas; los embriones maduraron sobre un medio endurecido con agar-agar 20 g/l y germinaron en un 10% bajo cultivo de dos fases: primero en un medio bajo ennitratos y sin reguladores, y posteriormente en medio MS con 0.3 mg/l de BA.

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V Congreso Mundial del Aguacate

Palabras Clave: Aguacate, nucelas, embriogénesis somática y auxinas.

INTRODUCCIÓN
El aguacate en Michoacán, México presenta problemas graves por enfermedades principalmente con antracnosis (Colletotrichum gloeosporioides), roña (Sphaceloma persea) y tristeza (Phytophthoracinnamoni), en casos extremos estas provocan la muerte del árbol o bien reducen la producción y calidad de la fruta hasta en un 14% (Vidales, 2001). La baja producción es un problema que la biotecnología puede solucionar a través de la transformación con genes resistentes, la selección clonal y mutagénesis; no obstante para utilizar estos mecanismos de mejoramiento genético in vitro se requiere eltener previamente el sistema de regeneración de una planta completa a través de embriogénesis somática u organogénesis adventicia (Villalobos y Thorpe, 1991). Éxito en embriogénesis somática en aguacate ha sido reportado con embriones cigóticos inmaduros (Mooney y Van Staden. 1987; Pliego-Alfaro y Murashige, 1988; Raviv et al.,1998 y Witjaksono y Litz, 1999a). Sin embargo, el establecimiento de estesistema con tejido nucelar de aguacate no esta reportado. El cultivo in vitro de las nucelas frecuentemente presenta necrosis y por consecuencia perdida de la competencia embriogénica; condiciones de obscuridad (etiolación del tejido), ácido ascórbico y L-cisteína fueron identificados como importantes componentes para evitar la necrosis en tejidos inmaduros y ha sido reportado en aguacate (Zirariand Lionakis, 1994; Llano-Agudelo et al., 1995; Mohamed-Yasseen, 1995; Witjaksono and Litz, 1999a) y en varias especies vegetales (Litz, 1984a; Litz, 1984b; Rout et al., 1995; Jiménez, 1998; Ara et al., 1999). En el presente estudio, se presentan los efectos de algunos componentes para evitar necrosis de las nucelas, así como el efecto de los reguladores de crecimiento sobre la embriogénesis...