Viablilidad de una celula
LICENCIATURA EN QUIMICO FARMACÉUTICO BIOTECNÓLOGO
MATERIA | CLAVE |
BIOLOGÍA CELULAR | |
PRACTICA No. 9 | DURACIÓN APROXIMADA |
Viabilidad Celular| 1.5 hrs |
OBJETIVO DE LA PRÁCTICA |
Aprender a cuantificar la viabilidad celular mediante el método de azul de tripano |
INTRODUCCIÓN TEÓRICA DE LA PRÁCTICA |
La viabilidad celular esun parámetro de control de calidad muy útil y necesario al realizar cultivos celulares in vitro, ya sea para fines de investigación o en el mantenimiento de las mismas en bancos de células (bancosde células madre, bancos de esperma, etc.). Esta técnica nos permite monitorear el estado que guardan las células a través del tiempo, después de someterlas a diferentes tratamientos, etc. Existenvarias técnicas para cuantificar la viabilidad celular, las cuales difieren en complejidad y costos de los reactivos y equipos necesarios para ella. El método de viabilidad por azul de tripano es uno delos más sencillos y económicos, se basa en la tinción de las células no viables. |
MÉTODO (S) |
Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica, tinción con azul de tripano,conteo celular en cámara de neubauer. |
PREGUNTA/CUESTIONARIO A RESOLVER ANTES DE LA PRÁCTICA |
1.- ¿Qué es el azúl de tripano?R=Es un coloide que se utiliza para diferenciar células vivas de célulasmuertas, las células muertas retienen el colorante2.- ¿Por qué tiñe las células no viables?R= Porque se introduce en el interior de las células que presentan roturas en la membrana y esas son noviables.3.- ¿Qué es la cámara de neubauer?R=es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en elfondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. |
BIBLIOGRAFÍA BÁSICA |
http://www.ub.es/biocel/wbc/tecnicas/contajecelular.htm |...
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