Vidrio

Cromatografía de fase normal

La cromatografía de fase normal o "Normal phase HPLC" (NP-HPLC) fue el primer tipo de sistema HPLC utilizado en el campo de la química, y se caracteriza por separarlos compuestos en base a su polaridad. Esta técnica utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil apolar, y se utiliza cuando el compuesto de interés es bastante polar. El compuesto polar seasocia y es retenido por la fase estacionaria. La fuerza de absorción aumenta a medida que aumenta la polaridad del compuesto y la interacción entre el compuesto polar y la fase estacionaria polar (encomparación a la fase móvil) aumenta el tiempo de retención.
La fuerza de interacción no sólo depende de los grupos funcionales del compuesto de interés, sino también en factores estericos de forma quelos isómeros estructurales a menudo se pueden diferenciar el uno del otro. La utilización de disolventes más polares en la fase móvil disminuye el tiempo de retención de los compuestos mientras quelos disolventes más hidrofóbicos tienden a aumentar el tiempo de retención.
La NP-HPLC cayó en desuso a los años setenta con el desarrollo del HPLC de fase reversa o Reversed-phase HPLC debido a lafalta de reproductibilidad de los tiempos de retención puesto que los disolventes próticos cambiaban el estado de hidratación de la silica o alúmina de la cromatografía.

Fase Normal
������ FM de bajapolaridad/ FE polar
������ Solutos poco polares eluyen primero
������ Incrementar la polaridad de la FM
tienen el efecto de reducir el tiempo de
elucion.
������ R-Polar- ciano, diol, amino,dimetilamino.
������ FM-baja polaridad- etil eter, cloroformo,
hexano


Establecimiento del método en
Cromatografía de reparto.
������ Mas complejo que en CG
– En CG la FM solo transportaba alsoluto
– En HPLC la FM interacciona con el soluto
������ Selección de columna - basado en las
fuerzas intermoleculares de los 3
componentes ( soluto, FE, FM).
������ La polaridad de la FE debe...