virus de influenza proteina viral

LA MAYORÍA DE LOS VIRIONES DE LA INFLUENZA A DEJAN DE EXPRESAR AL MENOS UNA PROTEÍNA VIRAL ESENCIAL
La segmentación del genoma del virus de la influenza A (IAV) permite recombinación génica rápida a costa de complicar la tarea de montar el genoma viral completo. Al mismo tiempo la toma de muestras para la expresión de múltiples proteínas virales en las células MDCK infectadas a unamultiplicidad baja con IAV, se observa que la mayoría de las células infectadas carecen de una expresión detectable de una o más proteínas virales esenciales. Consistente con esta observación, hasta el 90% de IAV de las células infectadas no liberan progenie infecciosa, indicando que muchos viriones infecciosos IAV anotados por ensayos de infectividad tradicionales son capaces de una sola ronda de lainfección. Esta fracción no fue afectada significativamente por objetivo o tipo de célula productora, pero variaron ampliamente entre las diferentes cepas IAV. Estos datos indican que IAV existe principalmente como un enjambre de complementación dependiente de viriones semi-infecciosos, y por lo tanto tradicional, dependiente propagación. Los ensayos de infectividad drásticamente puede desnaturalizar elverdadero potencial infeccioso de una población de virus.
Influenza virus A (IAV) plantea una amenaza constante de la salud pública. A pesar de la producción anual de vacunas contra la influenza estacional, las infecciones IAV son responsables de un promedio estimado de 36.000 muertes y 200.000 hospitalizaciones cada año en los Estados Unidos, un costo de casi $ 87 mil millones, y se levantantodas estas cifras dramáticamente con la introducción de cepas pandémicas cada 20 años más o menos.
La predicción de la aparición de la nueva epidemia o pandemia de cepas de IAV sigue siendo imposible, en gran parte debido a las determinantes virales que gobiernan la patogenicidad y transmisibilidad en los seres humanos, son poco conocidos. El genoma IAV consta de ocho segmentos de ARN en sentidonegativo, cada uno esencial para la infección productiva. La segmentación del genoma le confiere obviamente beneficios evolutivos al permitir a alta frecuencia de recombinación durante dual infección de las células huésped. Segmento de recombinación entre zoonótica y las cepas humanas de IAV genera periódicamente nuevos virus con potencial pandémico que replica eficientemente en humanos escaparinmunidad preexistente.
La segmentación, sin embargo, viene en el coste de los mecanismos que requieren para asegurar cosegregación de los ocho segmentos. La opinión generalizada es que IAV es capaz de producir una alta fracción de viriones con ocho segmentos funcionales. Aquí, proporcionamos pruebas contradictorias al demostrar que la mayoría de los viriones individuales IAV expresar una incompletaconjunto de las proteínas virales y son por lo tanto incapaces de replicación multiround. Además, se observó una variación considerable entre diferentes IAV cepas, lo que sugiere que la eficacia de la incompleta producción infecciosa de viriones puede representar un factor determinante de la novela eficiencia de transmisión y patogenicidad.


MATERIALES Y METODOS
Células y virus. Las célulasMDCK se mantuvieron en medio esencial mínimo (MEM; Gibco) más 7,4% de suero fetal bovino (FBS), células Vero se mantuvieron en medio RPMI 1640 (Gibco) más FBS al 7,4%, y las células A549 se mantuvieron en medio F-12 (Gibco) más 7,4% de FBS.
A Puerto / Rico/8/34 (PR8) (Mt. Sinaí tensión; H1N1), A / California /7.9 (Cal; H1N1), A / New Caledonia/20/99 (NewCal; H1N1), y A/Udorn/72 (Udorn; H3N2) sepropaga en embriones de huevo de gallina de 10-días de edad. Cuando se especifique en el texto, los virus se cultivaron en vez en células MDCK. Los títulos de IAV se determinaron por el tejido estándar de 50%
infecciosa cultura dosis (TCID50) de ensayo sobre células MDCK. Las multiplicidades de
infección (MOI) se calcularon sobre la base de títulos TCID50. VSV Indiana
cepa se cultivó en...