Vitamina a hplc
Páginas: 29 (7037 palabras)
Publicado: 3 de abril de 2011
HPLC |
Vitamina A en mieles enriquecidas |
|
Yehury Matamoros Durán |
CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCION (HPLC)
I. INTRODUCCION
La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia y la física. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva,cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.6
Las técnicas cromatográficas son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico) que arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado enun sólido. Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria. De este modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Después de que los componentes hayan pasado por la fase estacionaria, separándose, pasan por un detector que genera una señal que puede depender de la concentración y del tipo de compuesto.6Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.
II. MARCO TEORICO
El proceso cromatográfico
En el proceso cromatográfico las especies se distribuyen entre dos fases inmiscibles. Una fasefluye, la otra es estacionaria. La velocidad de migración de cada especie queda determinada por su “coeficiente de distribución”. Las especies que se distribuyen especialmente en la fase que fluye se mueven rápidamente. Las especies que se distribuyen preferencialmente en la fase estacionaria se mueven lentamente.
Las fases estacionarias estas constituidas por partículas porosas muy cercanas,empacadas en un tubo llamado columna. La fase móvil llena los espacios entre las partículas.
Las bandas de soluto se hacen cada vez mas anchas conforme pasan por la columna. Conforme emergen de la columna las bandas, quedan registrados sus perfiles de concentración llamados picos. Una serie de picos de una mezcla de componentes se llama cromatograma.
La cromatografía puede cumplir dos funcionesbásicas que no se excluyen mutuamente:
* Separar los componentes de la mezcla, para obtener los más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
* Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas
Tabla 1. Fase móvil y estacionaria de diferentes tipos decromatografías7
Fuente: Skoog D, West D, Holler F. (1995). Quimica Analitica. 6 Ed. Mc Graw Hill. Mexico
Tipos | Fase móvil | Fase estacionaria |
En papel | Líquido | Líquido (moléculas de agua contenidas en la celulosa del papel) |
En capa fina | Líquido | Sólido |
De gases | Gas | Sólido o líquido |
Líquida en fase inversa | Líquido (polar) | Sólido o líquido (menos polar) |
Líquida enfase normal | Líquido (menos polar) | Sólido o líquido (polar) |
Líquida de intercambio iónico | Líquido (polar) | Sólido |
Líquida de exclusión | Líquido | Sólido |
Líquida de adsorción | Líquido | Sólido |
De fluidos supercríticos | Líquido | Sólido |
Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividir según como esté dispuesta la fase estacionaria (FE):
1. Cromatografíaplana: FE se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel.
Las principales técnicas son:
* Cromatografía en papel
* Cromatografía en capa fina
2. Cromatografía en columna: FE se sitúa dentro de una columna.
Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:
* Cromatografía de líquidos
* Cromatografía de gases
* Cromatografía de fluidos...
Vitamina A en mieles enriquecidas |
|
Yehury Matamoros Durán |
CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCION (HPLC)
I. INTRODUCCION
La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia y la física. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva,cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.6
Las técnicas cromatográficas son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico) que arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado enun sólido. Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria. De este modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Después de que los componentes hayan pasado por la fase estacionaria, separándose, pasan por un detector que genera una señal que puede depender de la concentración y del tipo de compuesto.6Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.
II. MARCO TEORICO
El proceso cromatográfico
En el proceso cromatográfico las especies se distribuyen entre dos fases inmiscibles. Una fasefluye, la otra es estacionaria. La velocidad de migración de cada especie queda determinada por su “coeficiente de distribución”. Las especies que se distribuyen especialmente en la fase que fluye se mueven rápidamente. Las especies que se distribuyen preferencialmente en la fase estacionaria se mueven lentamente.
Las fases estacionarias estas constituidas por partículas porosas muy cercanas,empacadas en un tubo llamado columna. La fase móvil llena los espacios entre las partículas.
Las bandas de soluto se hacen cada vez mas anchas conforme pasan por la columna. Conforme emergen de la columna las bandas, quedan registrados sus perfiles de concentración llamados picos. Una serie de picos de una mezcla de componentes se llama cromatograma.
La cromatografía puede cumplir dos funcionesbásicas que no se excluyen mutuamente:
* Separar los componentes de la mezcla, para obtener los más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
* Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas
Tabla 1. Fase móvil y estacionaria de diferentes tipos decromatografías7
Fuente: Skoog D, West D, Holler F. (1995). Quimica Analitica. 6 Ed. Mc Graw Hill. Mexico
Tipos | Fase móvil | Fase estacionaria |
En papel | Líquido | Líquido (moléculas de agua contenidas en la celulosa del papel) |
En capa fina | Líquido | Sólido |
De gases | Gas | Sólido o líquido |
Líquida en fase inversa | Líquido (polar) | Sólido o líquido (menos polar) |
Líquida enfase normal | Líquido (menos polar) | Sólido o líquido (polar) |
Líquida de intercambio iónico | Líquido (polar) | Sólido |
Líquida de exclusión | Líquido | Sólido |
Líquida de adsorción | Líquido | Sólido |
De fluidos supercríticos | Líquido | Sólido |
Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividir según como esté dispuesta la fase estacionaria (FE):
1. Cromatografíaplana: FE se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel.
Las principales técnicas son:
* Cromatografía en papel
* Cromatografía en capa fina
2. Cromatografía en columna: FE se sitúa dentro de una columna.
Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:
* Cromatografía de líquidos
* Cromatografía de gases
* Cromatografía de fluidos...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.