Vitrificacion

Vitrificación: Una Alternativa para la Criopreservación de EmbrionesVitrification: An Embryo Cryopreservation AlternativePedro Cabrera*,1, Adriana Fernández*, Pedro Bastidas*, Magaly Molina**, Angélica Bethencourt*** y Thaís Díaz* *Instituto de Reproducción Animal e Inseminación Artificial, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de Venezuela (FCV-UCV), Apartado 4563, Maracay2101A, Estado Aragua, Venezuela. **Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, Sanidad Animal, Apartado 70, Maracay 2101A, Estado Aragua, Venezuela. ***Laboratorio de Hemoparásitos, Cátedra de Parasitología, FCV-UCV. Correo-E: cabrerap@ucv.ve1 A quien debe dirigirse la correspondencia (To whom correspondence should be addressed)ResumenA nivel mundial, la técnica de criopreservación de embrionesmamíferos más utilizada es la criopreservación lenta o estándar, la cual hace uso de equipos de criopreservación programados que descienden la temperatura a una tasa constante; sin embargo, la implementación de técnicas avanzadas de criopreservación como la vitrificación, surge como una alternativa factible. Debido a la importancia que ha tomado esta técnica de criopreservación desde su aparición en1985, se ha desarrollado la presente revisión, abordando aspectos básicos de la técnica y detallando algunos factores que intervienen en todo el proceso de vitrificación de embriones.(Palabras clave:  Ganado bovino,  vitrificación, embriones animales, conservación biológica)AbstractThe most commonly used cryopreservation technique for mammalian embryos is the standard cryopreservation method,which uses programmed equipments for freezing, that decrease temperature at a constant rate. However, implementation of more advanced techniques for cryopreservation, as  vitrification, rises as an alternative worldwide. Because of the importance that vitrification has reached since its beginning in 1985, this review focuses on basic aspects of the technique and details some factors that affect thewhole process of embryo vitrification.(Key words: Cattle, vitrification, animal embryos, biological preservation)Recibido:05/04/06 - Aprobado: 18/04/07IntroducciónLa vitrificación se refiere al proceso físico de solidificación de una solución  a bajas temperaturas  sin la formación de cristales de hielo. El fenómeno puede ser considerado como un incremento extremo de la viscosidad, que requiere dealtas tasas de enfriamiento y calentamiento (Vajta y Kuwayama, 2006).Estas tasas de enfriamiento necesitan el uso de soluciones de crioprotectores con concentraciones de 5 a 7 M, las cuales son más altas que las requeridas por la congelación equilibrada tradicional de aproximadamente 1 a 2 M (Vajta et al., 1996; Kasai, 1997; Kong et al., 2000; Vajta, 2000; Lopatárová et al., 2002; Papadopoulos etal., 2002).La estrategia de la vitrificación es básicamente diferente a la congelación lenta, ya que esta última intenta mantener un balance delicado entre diversos factores tales como la formación de hielo, el daño osmótico, la alteración del citoesqueleto, el efecto tóxico de los crioprotectores, la concentraciones intracelulares de electrolitos, la injurias causadas por el frío, la fractura dela zona pelúcida, la alteración de organelas intracelulares y el contacto célula-célula (Vajta y Kuwayama, 2006).Por el contrario, la vitrificación puede incrementar la probabilidad de algunas formas de injuria (Vajta, 2000), pero elimina totalmente los daños mecánicos causados por la formación de cristales de hielo tanto intra como extracelular, siendo ésta la mayor causa de muerte celular (Ali yShelton, 1993a; Darvelid et al., 1994; Vajta, 2000).El incremento de la tasa de enfriamiento disminuye el daño al citoesqueleto y al contenido lipídico de la membrana; a su vez, permite un pasaje rápido a través de la zona de temperatura de peligro que oscila entre 15 y -5ºC (Kong et al., 2000; Misumi et al., 2003).Un protocolo óptimo de vitrificación de embriones puede ser logrado gracias  al...