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ACTIVIDAD ENZIMÁTICA: CATALASA Y PTIALIN


INTRODUCCIÓN

La catalasa es una enzima presente en todos los tejidos y que descompone el peróxido de hidrógeno (H2O2 ) que es tóxico.

2 H2O2 2H2O + O2

La ptialina es una enzima, presente en la saliva, que hidroliza el almidón

OBJETIVOS

1.- Observar la acción de la ptialina presente en la saliva y de la catalasa
2.- Observar laacción de los ácidos, las bases y la temperatura en la acción enzimática

PROCEDIMIENTOS

Ptialina (1ª parte)

1.- Extrae saliva en un vaso precipitados

2.- Numera cuatro tubos de ensayo y vierteaproxidamente 1ml de saliva en cada uno de ellos, mantén los tubos a una temperatura entre 35 y 40ºC (baño termorregulado)

3.- En el tubo 2 añade 1 ml de ácido clorhídrico (20%)

4.- En el tubo3 añade 1 ml de sosa (20%)

5.- Añade a los 4 tubos 3 ml de solución de almidón

6.- El tubo 4 manténlo en hielo o agua fría

7.- Coloca los tubos 1, 2 y 3 en la cámara de cultivo o estufa a38ºC durante media hora.

Catalasa

1.- Corta en pequeños trozos, cuanto más pequeños mejor muestras de tejidos (hígado, patata, etc ...). Coloca algunos fragmentos de cada muestra en diferentestubos de ensayo.

2.- En un tubo añade fragmentos de todas las muestras

3.- Añade agua hasta cubrir sobradamente la muestra en cada uno de los tubos.

4.- Calienta y mantén 5 minutos en ebulliciónel tubo que contiene todas las muestras.

5.- Añade a todos los tubos 2 ml de agua oxigenada (10 vol%)

6.- Anota en qué tubos se produce efervescencia

Ptialina (2ª parte)

1.- Distribuyela mitad del volumen de los tubos 1, 2, 3 y 4, en los tubos etiquetados como 5, 6, 7 y 8

2.- Añade a los tubos 1, 2, 3 y 4 unas gotas de Lugol (presencia de almidón) y anota el resultado en latabla

3.- Realiza la prueba del Fehling (presencia de azúcares reductores) a las muestras que contienen los tubos 5, 6, 7 y 8.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS


Tubos 1 y 5
Saliva+Almidón...