Western blot

Electroforesis de proteínas
Está basada en el método de electroforesis el cual es una técnica que sirve para diferenciar (preferentemente) variedades de un mismo tipo de moléculas en este casoproteínas al añadirle un campo eléctrico lo cual va generando que migren dentro del gel, las proteínas se mueven de acuerdo a su peso molecular y las cargas presentes en estas.
La electroforesis deproteínas se hace usualmente en gel de SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate - PolyAcrylamide Gel Electrophoresis) ya que este es el medio perfecto para que las proteínas puedan correr a través del gel cuando sele agrega un flujo de cargas debido al efecto del detergente SDS que desnaturaliza a las proteínas, por su naturaleza anionica neutralizando las cargas, haciendo uniforme la facilidad con la cual lasproteínas migran a través del gel por perder su forma globular y por qué la poliacrilamida al estar compuesta de monómeros de acrilamida unidos aleatoriamente brindan un medio poroso lo que crea unflujo uniforme de las proteínas dependiente de su peso molecular y eliminando la dependencia del movimiento por las cargas que estas presenten en estas.
La muestra se deposita de lado negativo (-) delgel para así poder ser transportado por la corriente eléctrica hacia el lado positivo (+) lo que genera un flujo de diferentes proteínas a través del gel por la diferencia de cargas presentes que sedemuestran a través de la tinción.
Subir la temperatura de la muestra puede ayudar a obtener una mejor desnaturalización de las proteínas, un método recomendado es sumergir las muestras en aguahirviendo por 3 minutos y después meterlos en hielo, El resultado de todo esto es la obtención de bandas diferenciadas que al ser tenidas muestran la acumulación de proteínas de acuerdo a su peso molecular.Western blotting
Esta técnica también llamada inmunoblotting, por depender de anticuerpos relacionados al sistema inmune, sirve para detectar proteínas especificas en una mezcla compleja de...