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Criopreservación
La criopreservación es el proceso en el cual células o tejidos son congelados a muy bajas temperaturas, generalmente entre -80 ºC y -196 ºC (el punto de ebullición delnitrógeno líquido) para disminuir las funciones vitales de una célula o un organismo y poderlo mantener en condiciones de vida suspendida por mucho tiempo. A esas temperaturas, cualquier actividadbiológica, incluidas las reacciones bioquímicas que producirían la muerte de una célula, quedan efectivamente detenidas.
forman tanto fuera como dentro de la célula y son los cristales intracelulares los que comportándose como cuchillas cortan las estructuras internas de la célula, especialmente las membranas.
[editar]Criopreservantes
Un criopreservante es un compuesto químico que permite elmantenimiento de un tejido o de células por mucho tiempo cuando se las mantiene a baja temperatura. Los criopreservantes se catalogan de acuerdo a la velocidad para penetrar los tejidos, el grado de protección al cristal de agua que confieren y por la toxicidad química que pueden tener sobre las células. El grado de protección a las células está directamente vinculado al grado de asociación que tengan conel agua molecular. A mayor afinidad, menor el agua disponible para la cristalización dañina. Además, estos productos se utilizan en conjunto con los medios nutritivos líquidos que conforman las mezclas congelantes.
[editar]Aplicación
Las concentraciones criopreservantes son lamentablemente tóxicas para el tejido a temperatura ambiente, por lo cual, en el procedimiento de congelado, se debenrespetar ciertos tiempos de exposición del material a 4° C, para que el producto protector penetre el tejido sin alcanzar los niveles tóxicos referidos, antes del inicio del proceso de congelamiento propiamente tal. En el mismo sentido, cuando se procede a la técnica de descongelado, previo al uso del material, se lo debe someter a un lavado minucioso con medios nutritivos a concentracionesdecrecientes del criopreservante, para su
[editar]Elementos de una unidad de criopreservación
[editar]Cámara de congelación
Como su nombre lo indica es la unidad que permite congelar o "criopreservar" la muestra biológica por largo tiempo, preservando al mismo tiempo su viabilidad. Un sistema controlado por computadora controla el grado de congelación del vapor del nitrógeno para evitar el deterioro dela célula por fenómenos osmóticos o por la cristalización del agua.
[editar]Unidad de almacenamiento
Es en donde se almacena la muestra después de que esta ha alcanzado la temperatura deseada. Ya en esta unidad a la muestra se le colocan gradillas adecuadas al volumen y al tipo de muestra.
La criopreservación es útil para las técnicas de reproducción asistida, a las cuales acuden parejas conproblemas de fertilidad. Así se congela el semen del donante, con el fin de realizar varios intentos de fecundación del óvulo en el momento más adecuado.
[editar]Criopreservación en reproducción asistida
[editar]Criopreservación de espermatozoides
Esta criopreservación va a resultar muy interesante a la hora de querer conservar muestras de pacientes que por ejemplo van a someterse a untratamiento de quimioterapia. Como vamos a disponer de millones vamos a necesitar estandarizar el método. De esta forma, vamos a encontrar cuatro métodos:
1) Método 1: Alicuotar en pequeños volúmenes (menos de 0,5 ml) con un volumen igual de medio de congelación y sumergir en nitrógeno líquido.
2) Método 2: Añadir el crioprotector y mantener 45 minutos a 4ºC previo a sumergir en nitrógeno.
3) Método 3:Incubar a 4ºC y formar gotas sobre un bloque de CO2 sólido.
4) Método 4: Incubar a 4ºC y mantener dos horas en vapores de nitrógeno. De esta forma se simula una rampa suave de congelación.
5) Método 5: Usar un congelador biológico programable.
A pesar de la existencia de cuatro métodos, sólo a partir del tercero se van a obtener tasas de supervivencia aceptables, es decir, que sean...
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