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Facultad De Salud
Programa De Medicina
Laboratorio de Enzimas: AMILASA SALIVAL
Natali valentina Payares MsC.
OBJETIVOS
1. Determinar la taza de hidrólisis del almidón por acción de la amilasa salival, mediante la observación de pérdida de color del complejo Almidón-yodo.
2. Determinar el efecto de factores como temperatura, pH yconcentración de enzima en una reacción enzimática.
3. Analizar la relación entre la velocidad de reacción de la enzima amilasa salival y los factores ambientales.
FUNDAMENTOS TEÓRICOS
Una enzima es un catalizador natural o biológico. Estas moléculas generalmente son proteínas que dirigen y regulan miles de las reacciones biológicas particulares. Sin ser consumidas otransformadas en el proceso que participan las enzimas aumentan la velocidad de una reacción al disminuir la barrera de energía de activación de los reactivos y aumentando la velocidad a la cual se alcanza el equilibrio de reacción, pero no afectan la concentración final de los productos.
Las enzimas son generalmente proteínas de alto peso molecular. ( 10.000 – 500.000 9/Mol )Las cuales presentan grupos dentro de su estructura química capaces de interactuar con las moléculas de sustratos en una región especifica denominada sitio activo, para formar un complejo Enzima – sustrato ES.
E + S ES
Debido a las características estructurales propias de la enzima, solamente sustratos muy específicos pueden unirse a laenzima. La actividad enzimática esta determinada entre otros factores, por la adaptación de la estructura terciaria de la enzima (estructura nativa), que permite en forma extremadamente selectiva la unión al sustrato. Una vez que el sustrato se una al sitio activo, la enzima esta lista para convertir el sustrato en el producto adecuado.
E + S ES E+ P
La actividad de la enzima puede ser afectada por factores experimentales tales como: la concentración de enzima y de sustrato, el pH de la solución de reacción y la temperatura. Los factores ambientales pueden afectar la actividad de la enzima, puesto que los aminoácidos que conforman la molécula se afectan con estos factores, la actividad enzimática también esafectada (recuerde el efecto de estos factores en la estructura terciaria de una proteína).
Además de los factores mencionados anteriormente, las enzimas pueden alterar su actividad con la presencia de cofactores o grupos prostéticos, inhibidores o efectores alostéricos.
La amilasa salival
Es una enzima de peso molecular de 45.000 9/mol, responsable de catalizar la hidrólisis inicial depolímeros grandes de glucosa tales como almidón o glicógeno, en fracciones más pequeñas. Estos fragmentos eventualmente son fraccionados en sus monómeros componentes por otras enzimas digestivas en el cuerpo humano. Las unidades de glucosa son usadas posteriormente por las células como una importante fuente de energía.
La reacción de hidrólisis del almidón, involucra el clivaje(rotura) de un enlace glicosídico mediante la adición de una molécula de agua.
La reacción de hidrólisis de almidón por acción de la amilasa salival, puede ser detectada por la propiedad del almidón no hidrolizado de formar un complejo púrpura (morado) con el yodo. Una vez se inicia la hidrólisis del almidón, el complejo se rompe y el color púrpura cambia a café – rojizo yeventualmente desaparece para dar una solución incolora (Fig.1)
ALMIDON + I2 COMPLEJO AMILASA
PÚRPURA CAFÉ-ROJIZO INCOLORO
Hidrólisis de Final de almidón
la reacción...
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