comparaci+o

Universidad de San Carlos de Guatemala
Facultad de Agronomía
Lab. De bioquímica
Aux. Kelder Ortiz
Jueves, vespertina



















Practica #5
Cromatografía de aminoácidos y Espectrofotometría de proteínas



















Luis Vicente Gálvez S.
200517681

Guatemala 4 de abril de 2008.


Resultados

Cromatografía en capa fina deaminoácidos:











Distancia recorrida por el solvente= 6.6 mm
A= histidina 2.5/6.6= 0.3787
B= tirosina 2.3/6.6= 0.3484
C= fenilamina 2.6/6.6= 0.3939
D= muestra desconocida 2.4/6.6= 0.3636

Muestra
Dist. Mancha
Dist. Disolvente
Rf
Histidina
2.5
6.6
0.38
Tirosina
2.3
6.6
0.35
Fenilanina
2.6
6.6
0.39
Muestra Desconocida
2.4
6.6
0.36

Espectrofotometría deproteínas:


A= extracto acuoso
B= extracto salino
C= muestra problema
D= albumina
E= Sulfato de Sodio
F= solución D
G= solución C
H= solución B
I= solución A



Solución E, sulfato de sodio= 100%, no tiene proteínas, es el color más pálido.
Solución F, albumina= 88%= 2-log88%= 1.98
Solución G, muestra desconocida= 92%= 2-log92%= 0.0362
Solución H, extracto salino= 99%= 2-log99=0.436
Solución I, extracto acuoso= 97%= 2-log97= 0.0132

Muestra
Trans.
Absor.
Sulfato de Sodio
100%
0%
Albumina
88%
1.98%
Muestra Desconocida
92%
0.0362=3.62%
Extracto Salino
99%
0.436= 43.6%
Extracto Acuoso
98%
0.0132=1.32%

Discusión de Resultados

Para la utilización de la cromatografía en la prueba #1, en todas las soluciones se pudo observar que poseían diferentessolubilidades, por lo que fueron muy distintos sus recorridos, esto se puede interpretar como la correcta combinación de la solubilidad y del flujo del solvente, por el grado de separación cromatografíca que se obtuvo.
Para la prueba #2 se demostró que la solución de sulfato de sodio no contenía ningún tipo de proteínas, es por eso que tiene el color mas pálido y posee un 100% el paso de luz; a loque se refiere la albumina mostro menos porcentaje de luz, además fue la que se presento con un color mas fuerte a diferencia de las otras soluciones, ya que esta es la solución es la que contiene mas proteína. Con lo que respecta a la solución de extracto salino, extracto acuoso, se obtuvo una cierta igualdad a la que se debió al mal calculo de las proporciones en la mezcla de soluciones, o aluso excesivo de ambas soluciones que hizo que perdieran un mínimo de sus propiedades proteica; aunque al calcular su concentración la muestra del extracto acuoso obviamente es el que posee mas proteínas 26% que el extracto acuoso que solamente tiene 8.6% de concentración proteica, con lo cual el extracto acuso es más puro que el salino.

¿En que consiste la prueba de la cromatografía?
Esuna técnica que se utiliza para separar, identificar y a veces purificar una mezcla compleja de solutos solubles en un solvente común.
Definir 4 fuerzas de acción independiente. ¿Cuáles de esos factores son responsables de la movilización dela mezcla de sustancias a través del medio de sostén?
La velocidad de flujo del solvente, la solubilidad de las sustancias en el solvente, los efectos defraccionamiento y los efectos de absorción.
Los responsables de la movilización de la mezcla es la velocidad de flujo del solvente y la solubilidad de las sustancias en el solvente.
¿Cuál es la diferencia entre la cromatografía en papel y en capa fina?
La cromatografía en capa fina es una técnica donde la separación ocurre sobre una capa delgada de adsorbente que esta adherida a un soporteinerte, generalmente vidrio.
Se diferencia de la hecha con papel fino porque la separación ocurre más rápido, las manchas son más discretas y compactas, y se pueden usar los reactivos detectores corrosivos sin dañar el substrato o el adsorbente.
Calcule el valor Rf para todas las manchas:
Distancia recorrida por el solvente= 6.6 mm
A= histidina 2.5/6.6= 0.3787
B= tirosina 2.3/6.6= 0.3484...