M todos indirectos


1. FUNDAMENTO TEÓRICO
Técnicas de recuento en placa, (según Atlas y Bartha), basadas en colocar en un medio de cultivo adecuado un volumen determinado de muestra. Cada una de las célulasaisladas dará lugar, después de la incubación correspondiente, a una colonia de forma que el número de estas nos permitirá estimar el número de células presentes en la muestra plaqueada (sembrada).El sistema es fácil de utilizar en el caso de células aisladas. Puede realizarse sembrando en superficie (extendiendo un volumen dado de muestra sobre el medio de cultivo sólido) o enprofundidad (mezclando un volumen dado de muestra con el medio de cultivo antes que solidifique). Esta última opción permite realizar el recuento de microorganismos microaerófilos que no crecen bien en lasuperficie de las placas de cultivo. Para que el sistema de recuento en placa tenga validez estadística, es necesario contar entre 30 y 300 colonias con objeto de disminuir el error de lamedida.

2. OBJETIVO: Analizar las diferentes técnicas de recuento indirecto que existen para cuantificar los microorganismos.
3. EQUIPOS
Incubadora de 35°C ±1
Balanza granataria
Contador decolonias
4. MATERIALES Y REACTIVOS
Cajas de Petri
Agar plate count fundido
100 gramos de suelo
Tubos con agua peptonada al 0,1%
Pipetas estériles de 1 mL

5. PROCEDIMIENTO

-Adicione 1 g de suelo a9mL de agua peptona
-Realice diluciones seriada de hasta 10-4 por triplicado
-Siembre 1 mL de cada dilución en una caja de petri estéril
-Adiciones el agar
-Incube de acuerdo a las exigencias delmicroorganismo.
-A las 48 horas realice el conteo de colonias

6. ESTRATEGIAS DE EVALUACIÓN.
Reporte el conteo UFC/mL

UFC/mL
10-1
10-2
10-3

10-4
UFC




UFC




UFC





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7. PREGUNTASCOMPLEMENTARIAS:
‘ ¿ En qué consiste la técnica del NMP?

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Atlas Ronald y Bartha Richard.2002. Ecologìa Microbiana y Microbiología Ambiental.Prentice Hall.España.677p.