N 7 Punto Isoeléctrico

Facultad de Medicina
Bioquímica Práctica

PRÁCTICA Nº 7

TÍTULO: DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOELÉCTRICO DE LA GELATINA

1. Fundamento.-

La solubilidad de las proteínas varía de acuerdo con sutamaño y su composición de aminoácidos. En general las proteínas más solubles son las de peso molecular bajo y las que contienen un gran número de aminoácidos y que poseen grupos disociables libresdespués de haber participado en la formación de la unión peptídica, tales como el ác. Glutámico, la lisina, etc. A su vez, el estado de disociación de estos grupos ionizables libres también determina lasolubilidad y otras propiedades de la molécula proteica, como su unión con otras moléculas cargadas eléctricamente.
El valor de pH en el que la suma de todos los grupos ionizables cargadosnegativamente es igual al de todos los grupos ionizables cargados positivamente, se denomina Punto Isoeléctrico de la Proteína. La mayor parte de las proteínas son menos solubles a este valor de pH.

2.Objetivo.- Establezca el objetivo de la práctica.

3. Marco Teórico.- Investigue sobre:

Punto Isoeléctrico de las proteínas.

Punto isoeléctrico es aquel pH que conocemos, en el cual un determinadoaminoácido se presentara en estado de ion bipolar, o zwitterion.

Características - Propiedades de la Gelatina.



Electroforesis.




4. Materiales y Reactivos.-

Solución de ácido acético 0,1 M
Soluciónde Acetato de Sodio 0,1 M
Etanol de 96%
Solución de gelatina al 2%
Pipetas de 1, 2, 5 y 10 ml (2 de cada uno de los grupos)
Tubos de ensayo (6 por grupo)
Gradillas o porta-tubos (3 unidades)Marcadores a prueba de agua y calor.

5. Procedimiento.-
1. Numerar 5 tubos del 1-5 y proceder a medir las siguientes soluciones:

Nº del Tubo
Ácido Acético 0,1 M
Acetato de Sodio 0,1 M
1
4,5 ml
0,5 ml
2
4,0ml
1,0 ml
3
2,5 ml
2,5 ml
4
1,0 ml
4,0 ml
5
0,2 ml
4,8 ml

2. Mezclar adecuadamente cada uno de los tubos a fin de obtener soluciones homogéneas.
3. A cada uno de los tubos adicionar 2 ml de...