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 9/4/2015
Práctica 41: DETERMINACIÓN DE AGS DEL SISTEMA RH DIFERENTE DEL D (FENOTIPO Y GENOTIPO)
Introducción y objetivo
Losgenes que codifican la presencia de los antígenos del sistema Rh son dos. Un gen RHD que codifica la presencia del antígeno D y un gen RHCE que codifica la presencia de los otros antígenos. Parece quela presencia del gen RHD determina la aparición del antígeno D (sujetos Rh positivos) mientras que los individuos que no tienen antígeno D ( Rh negativos) no tienen este gen, por lo que se representacon la letra d.
El gen RHCE tiene 4 alelos: Ce, cE, ce y CE. Estos alelos son codominantes entre si. Cada uno de estos alelos determina la aparición de los correspondientes; así el gen Ce determinala aparición de los antígenos C y e, el gen cE determina la presencia de antígenos c y E , etc.
El objetivo de esta práctica es determinar el fenotipo y genotipo en función de los Ags que tenga.Fundamento
Para la determinación del fenotipo Rh completo se enfrentan hematíes problema con sueros anti-C , anti-c , anti-D , anti-E , anti-e y un control negativo. Al igual que la determinación de anti-D,se realizará dos veces, una en porta y otra en tubo, o bien por dos personas distintas.
Muestra
Sangre completa anticuagulada con EDTA o citrato si hacemos la prueba en porta. (Nuestro caso)Suspensión de hematíes 3-5% si hacemos la prueba en tubo.
Material y aparatos
-portaobjetos -palillos mezcladores
-papel de filtro -pipetas Pasteur
-indeleble -guantes
-visualizador
Reactivos
-Anti-c
- Anti-e
- Anti-E
- Anti-CDE
-Anti C (aunque no lo teníamos)
Procedimiento
1. Rotulamos los portas con las letras c, E, e y CDE
2. Echar una gota de anti-c en el porta con la letra c, una gota deanti-E en el porta con la letra E, una gota de anti-e en el porta con la letra e y una gota de anti-CDE en el porta con la letra CDE.
3. Con ayuda de una pipeta Pasteur, echar una gota de sangre...