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TRABAJO PRACTICO N ° 1

INTRODUCCIÓN.

Dicho trabajo práctico trata el tema de los microorganismos en el ambiente, analizando su influencia en las distintas superficies, tanto el suelo como cualquier otro medio que los contenga.
Dentro de los que mas nos interesan se encuentran los hongos y bacterias. Una de las principales características que los diferencian es que los primeros sonorganismos eucarióticas mientras que los segundos son procariotas. Luego, en cuanto al metabolismo, los hongos son aerobios heterótrofos y las bacterias son muy versátiles, hay aerobias, facultativas, etc.. PONER CITAS!
Es interesante destacar algunas propiedades de los mismos, ya que estas se van a poder presenciar en el desarrollo del trabajo. Los hongos se pueden presentar como filamentosos,formando un micelio, o pueden ser unicelulares (levaduras). En cuanto a las bacterias, estas se pueden encontrar como bacilos, cocos, entre otros. Una característica importante a destacar de este último grupo de microorganismos, es la composición de su pared celular (Gram. + o -) que para poder distinguir que microorganismo gobierna ese medio de cultivo en estudio, no se agrega sólo un colorante, elcristal violeta forma una laca con el Yodo del Lugol que resulta insoluble en agua.


OBJETIVOS.

Poner en evidencia la presencia de microorganismos (hongos y bacterias) presentes en diferentes superficies (animadas e inanimadas)
Comprobar el efecto que la desinfección superficial tiene sobre la contaminación de dichas superficies.
Utilizar medios de cultivo que difieren en composición yfunción, y poner en evidencia la diversidad microbiana que puede crecer en cada uno de ellos.
Observar por tinción simple las células que conforman una colonia bacteriana presente en el ambiente y crecida en medio de cultivo complejo para bacterias.

MATERIALES Y MÉTODOS
El trabajo se realizo en cuatro días:

DIA 1.
En este primer día de trabajo se utilizaron los siguientes materiales:Superficie contaminada con microorganismos
3 medios de cultivo (esterilizados en autoclave) en placas de Petri (esterilizadas en forma gaseosa con óxido de etileno):
MEDIO Agar extracto de malta + estreptomicina + cloranfenicol (complejo y selectivo para hongos)
MEDIO Agar nutritivo + Fluconazol (complejo por poseer extracto de peptona y selectivo, el fluconazol es un antimicótico que impide eldesarrollo de los hongos)
MEDIO sintético + Fluconazol (definido y selectivo, ya que las bacterias auxotrofas no crecen)
Isótopos esterilizados humedecidos
Toalla de papel humedecida con alcohol al 70° para desinfectar la superficie de trabajo
Alcohol 70°
Mechero

Con dichos materiales se procedió de la siguiente manera:

1) Se desinfectó superficie con alcohol al 70°
2) Se paso un hisopoestéril sobre la mano de un compañero para tomar una muestra de los microorganismos de esa superficie.
3) Luego se estrió sobre una mitad de una placa de Petri, abriéndola con cuidado cerca del mechero para evitar la contaminación del área. Lo mismo se hizo para las otras dos placas utilizando el mismo hisopo contaminado.
4) Con otro hisopo esterilizado se tomo una muestra sobre la mismasuperficie pero desinfectada con alcohol al 70°. Se procedió como en el paso uno y dos pero utilizando la otra mitad de la tres placas.
5) Por último se incubaron las placas a una temperatura de 20° por 24-48 horas.

DIA 2

Los materiales utilizados este día fueron:
Anza esterilizada a la llama del mechero
Colorante (Safranina)
Porta objetos desinfectado con alcohol al 70° y a la llama.Bandeja de sostén para el porta objetos
Agua destilada
Mechero
Microscopio
Placas de Petri incubadas en día 1
Caja de Petri esterilizada sin microorganismos con Agar nutritivo fresco.

Métodos:

1) Se analizó y se comparo el crecimiento microbiano en las tres placas sembradas en el día 1.
2) Se eligió una colonia aislada (ya que se quiere obtener un cultivo puro) de la placa que tenía...