Purificación y caracterización bioquímica de xilanasas deBacillus pumilus y su potencial de hidrólisis de los polisacáridos

Purificación y caracterización bioquímica de xilanasas deBacillus pumilus y su potencial de hidrólisis de los polisacáridos
Chundakkadu Asha Poorna
División de Biotecnología, Instituto Nacional de Ciencia y Tecnología Interdisciplinar (Laboratorio de Investigación Anteriormente Regional) (CSIR), Trivandrum-695019, India
* Autor para la correspondencia:
Chundakkadu Asha Poorna 
PlantMolecular Biology División 
Rajiv Gandhi Centro de Biotecnología 
del Gobierno de la India 
Trivandrum - 695 014, India Tel: 0471 hasta 2529453 Fax: 091-2491172 E-mail: apchundakkadu@gmail.com


 
Recibido el 27 de octubre 2011, aceptado 13 de diciembre 2011; Publicado 15 de diciembre 2011
 
Cita: Poorna CA (2011) Purificación y caracterización bioquímica de xilanasas de Bacillus pumilus y supotencial de hidrólisis de los polisacáridos. Fermentat Technol 1:101. doi: 10.4172/fmt.1000101
 
Copyright: © 2011 Poorna CA. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan.
 
Abstracto
 Xilanasas extracelulares libres de celulasa producida por la bacteria alcalofílica Bacillus Pumilus se purificó hasta la homogeneidad a lo largo de la precipitación con (NH 4 ) 2 SO 4 cromatografía, Q-Sepharose y caracterizado. Las xilanasas purificadas eran proteínas, con la masa molecular de ~ 14 kDa (Xyl 1), ~ 35 kDa (Xyl 2) y ~ 60 kDa (Xyl 3) tal como se determina por SDS-PAGE. La temperaturay el pH óptimo para la acción de la enzima fueron a 50 ° C y 7, respectivamente.Ellos exhiben estabilidad térmica en un rango de 20 a 40 º C a pH 7 y ha conservado 85% a 60 ° C. La actividad inhibida por 10 mm de Hg 2 + , SDS y Fe 2 + . La xilanasa exhibió valores de Km y Vmax fueron 4,0 mg / ml, 5,000 mol / proteína min / mg (Xyl 1), así como 3,5 mg / ml, 3,448 mol / min / mg de proteína (Xyl 2)para oatspelt xilano.
 
Palabras clave
 
-La estabilidad alcalina; Bacillus pumilus ; purificación; cultivo Solidstate; endoxilanasa; hidrólisis
 
Introducción
 
Hemicelulosas que actúan como material cementante entre la celulosa y la lignina, que se compone de pectina, arbinoxylan y xilano. Xilano es el componente principal con β-1, 4 - restos unidos a-D-xilopiranosil como columnavertebral y diferentes grupos de sustitución en la cadena lateral. Varias enzimas son necesarias para la hidrólisis completa y la asimilación de los xilanos, incluyendo β-endoxilanasa, β-xilosidasa, y xilosa isomerasa de los cuales β-endoxilanasa recibió la atención más amplio entre estos enzimas. Xilanasas tienen aplicaciones potenciales en los alimentos, alimentación, química, farmacéutica y depapel. Estas enzimas producidas por varias especies bacterianas y fúngicas. Hubo informes relacionados con la producción endoxilanasa porBacillus , con diferentes masas moleculares [ 1 ]. Cultivo de estado sólido (SSC) en el salvado de trigo como un sustrato es un procedimiento eficaz para la producción de xilanasa. Sin embargo, SSC ha ganado renovado interés en los últimos años para la producción demuchas enzimas debido a los menores costos de operación y los requisitos de energía [ 2 ]. El termotolerantes alcalofílico bacteria B. pumilus ha atraído la atención como una rica fuente de enzimas xilanolíticas. B. pumilus se informó anteriormente como buen productor de endoxilanasa libre de celulasa [ 3 ]. Este documento se centra en la purificación y caracterización bioquímica xilanasasextracelulares producidas por B. pumilus cultivan en SSC con salvado de trigo. Hasta ahora no hubo informes relacionados con xilanasas de bajo peso molecular a partir de esta especie bacteriana por SSC. De las tres isoformas purificadas Xyl-1 y Xyl-2 exhiben alta actividad frente a la hidrólisis de polisacáridos de plantas.
 
Materiales y Métodos
 
Condiciones de microorganismos y la cultura
 
B....