T Cnica

Técnica:
1. Preparáramos 5 juegos de diluciones de la muestra a analizar (d) 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000 y 1:100000 de la muestra solución salina isotónica estéril de manera que al final resulten 5tubos de cada dilución.
2. Dejamos en cada tubo 1ml de la solución correspondiente y agregamos 5ml de caldo lactosado con púrpura de bromesol. Mezclamos e incubamos en la estufa de cultivo a 37ºdurante 24 hrs.
3. Observamos los 5 tubos de cada dilución para determinar cuántos resultaron positivos al cambiar el caldo lactosado a color amarillo y anotar el número de tubos positivos por cadadilución.
4. Se obtiene una cifra de 3 dígitos (números) donde el primer digito es el número de tubos positivos de la dilución concentrada de las 3 últimas diluciones donde dónde hay tubos positivos.
5.Para saber el número de microorganismos más probable (NMP) que les corresponde a esta cifra de 3 dígitos buscamos en la siguiente tabla de probabilidades o de Mc Crady:

cifra
NMP
cifra
NMP
cifra
NMPCifra
NMP
000
0.0
203
1.2
400
1.3
513
8.5
001
0.2
210
0.7
401
1.7
520
5.0
002
0.4
211
0.9
402
2.0
521
7.0
010
0.2
212
1.2
403
2.5
522
9.5
011
0.4
220
0.9
410
1.7
523
12.0
012
0.6
221
1.2
411
2.0
52415.0
020
0.4
222
1.4
412
2.5
525
17.5
021
0.6
230
1.2
420
2.0
530
8.0
030
0.6
231
1.4
421
2.5
531
11.0
100
0.2
240
1.4
422
3.0
532
14.0
101
0.4
300
0.8
430
2.5
533
17.5
102
0.6
301
1.1
431
3.0
53420.0
103
0.8
302
1.4
432
4.0
535
25.0
110
0.4
310
1.1
440
3.5
540
13.0
111
0.6
311
1.4
441
4.0
541
17.0
112
0.8
312
1.7
450
4.0
542
25.0
120
0.6
313
2.0
451
5.0
543
30.0
121
0.8
320
1.4
500
2.5
544
35.0122
1.0
321
1.7
501
3.0
545
45.0
130
0.8
322
2.0
502
4.0
550
25.0
131
1.0
330
1.7
503
6.0
551
35.0
140
1.1
331
2.0
504
7.5
552
60.0
200
0.5
340
2.0
510
3.5
553
90.0
201
0.7
341
2.5
511
4.5
554
160.0202
0.9
350
2.5
512
6.0
555
180.0

6. calculamos y reportamos los microorganismos (moo/ml) con la fórmula: moo/ml=NMP x d
7. NOTA: en caso de que los 25 tubos resultaran ser positivos se hace una...