Ufc´s unidades formadoras de colonia
Páginas: 6 (1355 palabras)
Publicado: 2 de diciembre de 2011
Cuestionario previo 3.
Unidades formadoras de colonias o ufc´s/ ml
1. ¿Qué es el recuento en placas o las unidades formadoras de colonia?
Unidades Formadoras de Colonias (UFC), término que debe utilizarse para reportar la cuenta de colonias en placa, las cuales pueden surgir de una célula o de un cúmulo de células. Es la cantidad de células separables sobre la superficie o dentro de unmedio de agar semisólido que da lugar al desarrollo de una colonia visible del orden de decenas de millones de células descendientes.
2. ¿Cómo se realiza este método de unidades formadoras de colonia?
Método de profundidad:
Preparar la muestra de alimento traida según su tipo, si es líquido hay que
homogenizar, si es sólido hay que licuar o triturar la mezcal por trituración en un vasoesterilizado de licuadora auna velocidad aproximada de 14.000 rpm y en un tiempo medio de 60-90 segundos.
Preparamos las diluciones correspondientes, generalmente hacemos 6 diluciones (de 10-1 a 10-6).
Hacer las diluciones, y de haber agregado los inóculos, pasamos a agregara cada placa el agar Plate Cound, este debe estar a 45 – 46 ºC (10 a 15 mL por placa).
Hacemos la mezcla (agar +inóculo).
La mezcla se realiza de la sgte. Manera: hacer rotaciones 5 veces sentido horario, 5
veces de abajo arriba, 5 veces antihorario y 5 veces derecha e izquierda.
Esperamos que solidifique el medio y luego incubamos a 29 – 31 ºC por 24h
(dejamos una placa control).
Realizamos las lecturas a las 24 y 48 h
Se puede realizar un computo de recuento estandar en placa o computo estimado derecuento estandar en placa.
Hay que elegir placas que tengan de 30 a 300 colonias.
Para contar usamos el contador de colonias.
3. ¿Qué tan importante es este método en la industria alimentaria?
En el grupo de los mesófilos aerobios se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollarse a 30°C en las condiciones establecidas. En este recuento se estima lamicroflora total sin especificar tipos de microorganismos. Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulación y las condiciones higiénicas de la materia prima. Un recuento bajo de aerobios mesófilos no implica o no asegura la ausencia de patógenos o sus toxinas, de la misma manera que un recuento elevado no significa la presencia de flora patógena. Ahora bien, salvo en alimentosobtenidos por fermentación no son recomendables recuentos elevados.
Un recuento elevado puede significar:
Excesiva contaminación de la materia prima.
Deficiente manipulación durante el proceso de elaboración.
La posibilidad de que existen patógenos, pues estos son mesófilos.
La inmediata alteración del producto.
4. Dentro de las normas de SSA describa la metodología que se utiliza paracereales.
Del método de prueba para la determinación de aflatoxinas en cereales.
Preparación de la muestra.
Moler la totalidad de la muestra compuesta hasta que pase por un tamiz con una abertura de 850 µm (No. 20). Extracción por columnas de inmunoafinidad.
Fundamento.
Las AF son extraídas de la muestra, con metanol al 80%, el extracto es filtrado y diluido con agua, filtrado y pasado através de una columna de inmunoafinidad la cual contiene un anticuerpo monoclonal específico para AF. En este estado la aflatoxina se liga al anticuerpo de la columna. La columna es entonces lavada con agua para eliminar impurezas. Posteriormente, después de pasar metanol a través de la columna, las AF son removidas del anticuerpo, esta solución es medida en un fluorómetro previa derivatización consolución diluida de bromo. Las AF son cuantificadas en forma total.
5. ¿Cómo determinaría la presencia de coliformes en lácteos y aguas?
El método es sencillo: incubación en medio de MacConkey a 44ºC en anaerobiosis. Análisis de las colonias positivas para detección de la producción de gas en medio con lactosa y de indol en medio con triptófano, ambas determinaciones a 44ºC.
Cuando los...
Unidades formadoras de colonias o ufc´s/ ml
1. ¿Qué es el recuento en placas o las unidades formadoras de colonia?
Unidades Formadoras de Colonias (UFC), término que debe utilizarse para reportar la cuenta de colonias en placa, las cuales pueden surgir de una célula o de un cúmulo de células. Es la cantidad de células separables sobre la superficie o dentro de unmedio de agar semisólido que da lugar al desarrollo de una colonia visible del orden de decenas de millones de células descendientes.
2. ¿Cómo se realiza este método de unidades formadoras de colonia?
Método de profundidad:
Preparar la muestra de alimento traida según su tipo, si es líquido hay que
homogenizar, si es sólido hay que licuar o triturar la mezcal por trituración en un vasoesterilizado de licuadora auna velocidad aproximada de 14.000 rpm y en un tiempo medio de 60-90 segundos.
Preparamos las diluciones correspondientes, generalmente hacemos 6 diluciones (de 10-1 a 10-6).
Hacer las diluciones, y de haber agregado los inóculos, pasamos a agregara cada placa el agar Plate Cound, este debe estar a 45 – 46 ºC (10 a 15 mL por placa).
Hacemos la mezcla (agar +inóculo).
La mezcla se realiza de la sgte. Manera: hacer rotaciones 5 veces sentido horario, 5
veces de abajo arriba, 5 veces antihorario y 5 veces derecha e izquierda.
Esperamos que solidifique el medio y luego incubamos a 29 – 31 ºC por 24h
(dejamos una placa control).
Realizamos las lecturas a las 24 y 48 h
Se puede realizar un computo de recuento estandar en placa o computo estimado derecuento estandar en placa.
Hay que elegir placas que tengan de 30 a 300 colonias.
Para contar usamos el contador de colonias.
3. ¿Qué tan importante es este método en la industria alimentaria?
En el grupo de los mesófilos aerobios se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollarse a 30°C en las condiciones establecidas. En este recuento se estima lamicroflora total sin especificar tipos de microorganismos. Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulación y las condiciones higiénicas de la materia prima. Un recuento bajo de aerobios mesófilos no implica o no asegura la ausencia de patógenos o sus toxinas, de la misma manera que un recuento elevado no significa la presencia de flora patógena. Ahora bien, salvo en alimentosobtenidos por fermentación no son recomendables recuentos elevados.
Un recuento elevado puede significar:
Excesiva contaminación de la materia prima.
Deficiente manipulación durante el proceso de elaboración.
La posibilidad de que existen patógenos, pues estos son mesófilos.
La inmediata alteración del producto.
4. Dentro de las normas de SSA describa la metodología que se utiliza paracereales.
Del método de prueba para la determinación de aflatoxinas en cereales.
Preparación de la muestra.
Moler la totalidad de la muestra compuesta hasta que pase por un tamiz con una abertura de 850 µm (No. 20). Extracción por columnas de inmunoafinidad.
Fundamento.
Las AF son extraídas de la muestra, con metanol al 80%, el extracto es filtrado y diluido con agua, filtrado y pasado através de una columna de inmunoafinidad la cual contiene un anticuerpo monoclonal específico para AF. En este estado la aflatoxina se liga al anticuerpo de la columna. La columna es entonces lavada con agua para eliminar impurezas. Posteriormente, después de pasar metanol a través de la columna, las AF son removidas del anticuerpo, esta solución es medida en un fluorómetro previa derivatización consolución diluida de bromo. Las AF son cuantificadas en forma total.
5. ¿Cómo determinaría la presencia de coliformes en lácteos y aguas?
El método es sencillo: incubación en medio de MacConkey a 44ºC en anaerobiosis. Análisis de las colonias positivas para detección de la producción de gas en medio con lactosa y de indol en medio con triptófano, ambas determinaciones a 44ºC.
Cuando los...
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