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UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA NACIONAL

FACULTAD REGIONAL RESISTENCIA





INGENIERÍA QUÍMICA

CÁTEDRA DE BIOTECNOLOGÍA

























Guía de Trabajos Prácticos
DOCENTES:

PROFESORADJUNTO LIC. LILIANA E. VERGARA

JEFE DE TRABAJOS PRÁCTICOSBIOQCA. LAURA I. STELLA

AUX. DOCENTE ING. ROCÍO GARCÍAAlumna: Prado, Daiana Magalí

CICLO LECTIVO 2014

TRABAJO PRÁCTICO Nº 1

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN ENLABORATORIO. MEDIOS DE CULTIVO


PARTE A. MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

OBJETIVOS

Adquirir experiencia en el manejo de equipos de esterilización y aplicar métodos de desinfección y esterilización empleando distintos agentes físicos o químicos.


MARCO TEÓRICOAl tratar los métodos de esterilización es conveniente dar una definición clara del término y de otros relacionados, ya que a veces suelen producirse confusiones.

La esterilización es la operación que tiene por objeto destruir o eliminar toda forma de microorganismos vivos en un ambiente determinado (medio de cultivo, material, equipo, sala de siembra, etc.), la que se lleva a cabo generalmentepor métodos físicos (filtración, calor, rayos) o por productos químicos.

Esta definición excluye por lo tanto cualquier técnica que resulte solamente en un daño a los microorganismos o atenuación de la actividad de cualquier tipo.

La palabra desinfección se aplica a la remoción o destrucción por cualquier vía de organismos vivos que pueden causar un daño particular o infección. No significapor lo tanto la destrucción de todos los microorganismos, sino solamente de aquellos que pueden producir un resultado no deseado. Un antiséptico es un desinfectante, o sea un agente químico usado para destruir microorganismos dañinos. Se utiliza en general para agentes a ser aplicados en animales o humanos.

Asepsia (del griego ἀ privativa y σῆψις, putrefacción)es la ausencia de gérmenes quepuedan producir infecciones o enfermedades. En el laboratorio, el cultivo de microorganismos es llevado a cabo en condiciones de asepsia, así como en muchas fermentaciones industriales. El medio de cultivo es esterilizado para remover toda forma de vida y luego inoculado con el cultivo requerido. Se dice entonces que el sistema se mantiene en condiciones asépticas.

La razón fundamental paraefectuar la esterilización en Biotecnología es evitar la competencia por los nutrientes en los medios de cultivo, permitiendo que el desarrollo de los microorganismos específicos utilizados en un proceso fermentativo, proporcione los rendimientos esperados en biomasa y/o metabolitos específicos.

La esterilización puede ocurrir por destrucción total de microorganismos; por muerte o inactivación (sinque exista necesariamente desintegración de las células) o por eliminación con medio físicos.

En el laboratorio se usan diversos métodos físicos y químicos según el cuadro siguiente













MÉTODOS

FÍSICOS












MÉTODOS

QUÍMICOS



Directo: Flameado (varillas, bordes de tubos, ansas).

Seco: Horno Pasteur (material de vidrio: placas, tubos,etc.).

Calor
Autoclave.


Húmedo
Hervidor.
Medios de cultivo


Pasteurización.







Tindalización.





Materiales porosos, celulósicos, cerámicos o láminas de

Filtración
polímeros sintéticos.


Líquidos límpidos.

Otros métodos




Luz ultravioleta.




Rayos Gamma.








Germicidas. Bactericidas. Antisépticos.

Desinfectantes.


1.ESTERILIZACIÓN POR CALOR:

El calor es el método empleado con más frecuencia; destruye las células por coagulación de las proteínas. La temperatura de muerte térmica depende de una serie de variables, a saber:

Humedad del medio o sistema.

Agua contenida en la célula.

pH.

Composición del medio.

Edad biológica de las células.

Presencia o ausencia de esporas.

1.2....