Analisis De Resultados

ANALISIS DE RESULTADOS:

Con los resultados de la parte A describa el fundamento de la técnica de aislamiento por el punto isoeléctrico y compárelo con otras 3 técnicas de aislamiento, indicandolas ventajas y desventajas de estos métodos.

Fundamento:
(Precipitación por punto isoeléctrico)
El fundamento básico de la técnica, radica como su nombre lo indica en la utilización del puntoisoeléctrico de la proteína para lograr su aislamiento del medio en donde se encuentra, en este caso se aisló caseína de la leche.
Dependiendo del pH del medio en el que se encuentren los aminoácidospueden tener carga negativa, positiva o compensada.
Por lo tanto la carga de una proteína va depender del tipo de aminoácido que la forman y del pH del medio en que se encuentre.
El puntoisoeléctrico (pI) es el pH para el cual la proteína presenta carga neta compensada, y en el mismo la solubilidad es mínima a pH>pI la carga que presenta la proteína es negativa y el pH < pI la cargaserá positiva.
Modificando el pH del medio se pueden neutralizar las cargas, haciendo la carga neta igual a cero, gracias a esto es posible purificar las proteínas. Alcanzando el punto isoeléctricose precipitaran, en el caso de la caseína se presipita a un pH de 4.8 por lo cual re requiere acidificar el medio.
De acuerdo con el punto A de la práctica, posteriormente se llevo a cabo unapurificación de la caseina, en el cual se utilizo la tecnica de centrifugación, y posteriores lavados, cabe resaltar que los lavados se realizaron del mas polar (H2O), hasta el menos polar que fue el éterétilico, esto con la finalidad de eliminar correctamente el agua, y asi obtener una purificación correcta y por lo tanto un secado efectivo de la caseína.
Ventaja: Facil estracción de la proteína.Desventaja: No es selectiva, es decir precipitara una mezcla de proteínas.
(Cromatografía de intercambio iónico)
La columna está (empacada) con un soporte al que van unidos grupos cargados...