Antrona

INSTITUTO'POLITÉCNICO'NACIONAL! ! ESCUELA'NACIONAL'DE'CIENCIAS' BIOLÓGICAS!
! !
QUÍMICO(BACTERIÓLOGO(PARASITÓLOGO(

LABORATORIO(DE((FISIOLOGÍA((Y(BIOQUÍMICA( MICROBIANA(
PRÁCTICA(No.(2( “BALANCE(DE(FERMENTACIÓN”(
GRUPO: 6QV1 EQUIPO: 6

INTEGRANTES:
o o o o Cornejo!Julio!Cesar!! Rivera!!Rivero!Diego!Josimar! Sandoval!Sánchez!Mirla!Galia!Guadalupe! Vazquez!Gonzales!Virginia!Objetivos:+
( Con(los(datos(obtenidos(experimentalmente,(el(alumno(realizará(el(balance(de(carbonos(y( el(balance(de(óxidoHreducción.(Discutirá(y(evaluará(el(significado(de(dicho(balance(para(la(( fermentación(alcohólica(mediante(la(utilización(de(la(levadura(saccharomyces*cereviciae.( ( Discutir( el( significado( de( dichos( resultados( para( determinar( si( se( obtuvo( un( buen(rendimiento(en(cuanto(a(la(obtención(de(los(productos.( (

Hipótesis:+
Si( ( la( levadura( Saccharomyces* cerevisiae( realiza( la( fermentación( alcohólica,( entonces( al( colocarla(en(un(ambiente(anaerobio(a(partir(de(una(molécula(de(glucosa(dara(como(productos(2( moléculas( de( etanol( y( dos( de( CO2,( entonces( en( el( balance( de( fermentación( obtendremos( un(rendimiento(máximo(de(88%(de(carbono(recuperado((y(un(índice(de(O/(R(de(1.( (

Diseño+experimental+
( Para( ( demostrar( que( Saccharomyces* cerevisiae( en( condiciones( anaerobias( como( producto( de( fermentación(se(obtienen(etanol(y(CO2(se(colocara(a(esta(levadura(en(un(sistema(con(las(siguientes( condiciones,(sin(olvidar(hacer(un(testigo( ( ( Vaso(central( ( H0.2(ml(de(NaOH(al( ( 20%( ( ( ( ( Cámara(principal( (H2ml(de(suspensión(de(celulas( ( (Saccharomyces*cerevisiae)( ( H0.5(ml(de(regulador(de(fosfatos( ( ( Posteriormente( se( le( añadió( 0.5( ml( de( Glucosa( a( 2M( solo( al( problema.( En( este( matraz( se( deja( realizar(la(fermentación,(la(cual(se(detendrá(añadiendo(la(cámara(principal(ácido(tricloro(acético( (TCA)( para( después( cuantificar( los( productos.( La( glucosa( fermentada( se( determinó( de( manera(indirecta(cuantificando(al(azúcar(residual(por(el(método(de(DNS.( ( El(etanol(se(determina((recuperando(el(contenido(de(la(cámara(principal(y(neutralizando(con(KOH)(( por(el(método(de(Conway((leyendo(la(absorbancia(a(445nm)( (

vaselina(en(los(extremos(

( Cámara!central!( H(2(ml(de(K2Cr2O7(( ( ( Cámara!externa( ( H(alícuotas(de(la(muestra(y(completar(a(1(ml(con(agua( ( destilada((H(2ml(de(K2CO3(y(sella(inmediatamente(con(una(placa(de( ( vidrio( ( ( ( ( La(cuantificación(de(CO2(se(realizó(por(un(método(gravimétrico(determinándolo(en(BaCO3,(el(cual( se(forma(a(partir(del(Na2CO3(contenido(en(el(vaso(central(y(se(transfirio(a(un(matraz(erlenmeyer( con( 20( ml( de( BaCl2( al( 5%( y( se( obtuvo( Na2CO3.( Finalmente( una( vez( obtenidos( los( mg( de( azúcar(fermentada(y(los(productos(de(esto(se(realizo(el(balance(de(fermentación,( ( (

Fundamentos++
MÉTODO DE CONWAY
! Este( método( se( basa,( en( que( si( una( sustancia( volátil( y( un( solvente( puro( se( mantienen( en( compartimientos(separados(pero(en(contacto(con(la(misma(atmósfera,(el(soluto(volátil(tendera(a( disolverse(en(el(solvente(puro.(Finalmente(esto(implica(una(difusión(del(soluto(desde(la(solución( original(al(solvente.(( El( alcohol( se( oxida( por( acción( de( una( solución( de( dicromato( de( potasio( (K2Cr2O7)( en( un( medio( ácido((H2SO4),(mediante(esta(reacción(el(alcohol(se(oxida(en(acido(acético(y(el(K2Cr2O7(se(reduce(se( cromo(trivalente(

2 K2Cr2O7 + 8 H2SO4 + 3 C2H5OH
(

2 Cr(SO4)3 + 2 K2SO4 + 3 CH3COOH + 11 H2O

K2CO3(+(H2O(((((((((((((((((((((CO2((+((KOH(

DETERMINACIÓN DE GLUCOSA RESIDUALPOR EL MÉTODO DE DNS
El( método( de( la( antrona( se( fundamenta( en( la( formación( de( un( complejo( colorido( (azulHverdoso)( producido(por(la(reacción(entre(el(furfural(o(sus(derivados(con(antrona(dando(como(producto(de( esta( reacción( 10HcetoH9,10Hdihidroxiantraceno( en( medio( ácido,( cuya( máxima( absorción( es( a( 620( nm.( (

DIÓXIDO(DE(CARBONO(DESPRENDIDO.(MÉTODO(GRAVIMÉTRICO.(...