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EVALUACIÓN DEL CRECIMIENTO DE Bacillus subtillis EN
CULTIVO DISCONTINUO
María Fernanda Ávila, Laura Maritza Cristancho Guerrero,
Isabel Cristina Bustos Vega
RESUMEN
Un cultivo discontinuo o sistema cerrado se caracteriza porque en el tiempo
programado no se adicionan nuevos nutrientes ni se realiza remoción de
desechos. Comúnmente la evaluación de biomasa microbiana se realiza por
métodosdirectos en cámara de naubauer pero son más significativas las
desventajas que las ventajas. Bacillus subtilis es un bacilo Grampositivo cuyo
hábitat natural es el suelo, se encuentra ampliamente distribuido en la
naturaleza. Entre sus principales características se encuentra su capacidad
para formar esporas en diversas condiciones de estrés, crecer en un intervalo
amplio de temperaturas(desde 15 hasta 55 ºC), presentar motilidad, aerotaxis
y velocidades de crecimiento altas, sobrevivir en concentraciones salinas
(hasta el 7% de NaCl), producir una amplia variedad de antibióticos y enzimas
hidrolíticas extracelulares. En esta práctica de laboratorio mediante este
fermentador de flujo discontinuo se evaluó la biomasa microbiana dando como
resultado la cinética de crecimientocaracterística. Hubo una replicación
significativa dada por las óptimas condiciones a las que se expuso este bacilo
Grampositivo, ya que el contenido nutricional (carbono, nitrógeno y fosforo) son
ideales y fundamentales para el crecimiento y supervivencia; y así permiten
observar las diferentes fases de crecimiento.

INTRODUCCION
El crecimiento de una población microbiana se estudiaanalizando la curva de
crecimiento
de
un
cultivo
microbiano.
Cuando los microorganismos se cultivan en un medio líquido, normalmente se
trata de un cultivo discontinuo o en sistema cerrado, debido a esto las
concentraciones de nutrientes disminuyen y las de residuos aumentan. Bacillus
subtilis es un microorganismo cuyo hábitat natural es el suelo, se encuentra
ampliamente distribuido en lanaturaleza. Entre sus principales características
se encuentra su capacidad para formar esporas en diversas condiciones de
estrés, crecer en un intervalo amplio de temperaturas (desde 15 hasta 55 ºC),
presentar motilidad, aerotaxis y velocidades de crecimiento altas, sobrevivir en
concentraciones salinas (hasta el 7% de NaCl), producir una amplia variedad
de antibióticos y enzimas hidrolíticasextracelulares. Además un sustrato para
el cultivo de algunos microorganismos es la glucosa, por lo cual comúnmente,
no solo por su alto contenido de lactosa, sino porque se tiene componentes
importantes como el Ca2+, un cofactor de crecimiento microbiano, además de

ácidos grasos, vitaminas, minerales y una actividad acuosa ideal 1. Estos
factores nutricionales son importantes para eldesarrollo microbiano, ya que
permiten la activación de las principales vías metabólicas, así como la síntesis
de ADN, RNA y proteínas, procesos bioquímicos importantes durante el
crecimiento. Además, el contenido nutricional de este medio de cultivo para
cepas como Bacillus subtillis presenta una relación C:N:P ideal para este
microorganismo. Entonces, los componentes nutricionales y sus cantidadespermiten observar en cultivo las diferentes fases de crecimiento microbiano
descritas por Monod. Por lo cual el objetivo de esta práctica es evaluar el
crecimiento de Bacillus subtillis en un cultivo discontinuo usando caldo
nutriente.

MATERIALES Y METODOS
1. Caja de Petri con cultivo primario de Bacillus subtilis
2. Tomar el erlenmeyer que tiene 500 mL de caldo leche y distribuir en 2erlenmeyer estériles este medio, para ello se debe usar una probeta
estéril.
3. El volumen final en cada erlenmeyer debe ser de 50 mL.
4. Tomar 6 mL del inóculo preparado e inocular este volumen en cada uno
de los erlenmeyer antes preparados con caldo leche. Se debe tener en
cuenta que cada erlenmeyer al final tiene un inóculo de 6mL.
5. Tomar una muestra de 1 mL del erlenmeyer marcado como...