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Páginas: 9 (2150 palabras)
Publicado: 4 de marzo de 2013
ACTIVIDAD PROTEOLÍTICA DE LA PAPAÍNA Y EL EFECTO DE ALGUNOS INHIBIDORES
INTRODUCCION
Las enzimas proteolíticas son las que ayudan a digerir las proteínas contenidas en los alimentos. Aunque el cuerpo produce esas enzimas en el páncreas, ciertos alimentos también contienen enzimas proteolíticas.
La papaya y la piña son dos de las fuentes de plantas más ricas, como se atestigua por su usotradicional como "ablandadores" naturales para la carne. La papaína y la bromelina son los nombres respectivos para las enzimas proteolíticas que se encuentran en estas frutas. Las enzimas que produce el cuerpo se llaman tripsina y quimotripsina.
El principal uso de las enzimas proteolíticas es como una ayuda digestiva para las personas que tienen problemas para digerir proteínas. Sin embargo, porrazones que son menos claras, las enzimas proteolíticas también parecen reducir el dolor y la inflamación.1
DIAGRAMAS DE FLUJO
1. Preparación de las soluciones enzimáticas
a. Jugo de papaya
Macerar 30 gr de papaya en un mortero y sin agregar agua
Macerar 30 gr de papaya en un mortero y sin agregar agua
Filtrar a través de doble gasa o de muselina
Filtrar a través de doble gasa o demuselina
Rotular el filtrado cómo solución enzimática 1.
Rotular el filtrado cómo solución enzimática 1.
b. Ablandador de carne
A 3 gr de ablandador de carne agregar 10 ml de agua destilada
A 3 gr de ablandador de carne agregar 10 ml de agua destilada
Mezclar y centrifugar
Mezclar y centrifugar
Separar el sobrenadante y rotular el filtrado cómo solución enzimática 2.Separar el sobrenadante y rotular el filtrado cómo solución enzimática 2.
2. Ensayo de la prueba enzimática
En un tubo de ensayo pipetear 0.5 mL de cualquiera de las soluciones enzimáticas.
En un tubo de ensayo pipetear 0.5 mL de cualquiera de las soluciones enzimáticas.
Agitando suavemente se nota el incremento de viscosidad.
Agitando suavemente se nota el incremento de viscosidad.Mezclar e incubar a 50°C hasta la formación del coágulo.
Mezclar e incubar a 50°C hasta la formación del coágulo.
Adicionar 3.0 mL de leche.
Adicionar 3.0 mL de leche.
3. Efecto de la concentración de la papaína
Marcar cuatro tubos de ensayo y preparar diluciones
Marcar cuatro tubos de ensayo y preparar diluciones
Notar que las diluciones quedan de 1, ½, ¼, y 1/8 respectivamente.Notar que las diluciones quedan de 1, ½, ¼, y 1/8 respectivamente.
Mezclar y transferir 0.5 mL al tubo descartando 0.5 mL de éste último
Mezclar y transferir 0.5 mL al tubo descartando 0.5 mL de éste último
Mezclar por inversión el contenido del tubo 2 y transferir 0.5 mL de este tubo al tubo 3
Mezclar por inversión el contenido del tubo 2 y transferir 0.5 mL de este tubo al tubo 3
Agregar 0.5mL de agua destilada a todos los tubos excepto al primero
Agregar 0.5 mL de agua destilada a todos los tubos excepto al primero
En los tubos 1 y 2 pipetear 0.5 mL de la solución enzimática 1
En los tubos 1 y 2 pipetear 0.5 mL de la solución enzimática 1
4. Inhibición de las sulfidril proteasas
De la mejor dilución que resultó la formación del coágulo, es decir mayor actividadenzimática.
De la mejor dilución que resultó la formación del coágulo, es decir mayor actividad enzimática.
Preparar 5 mL y llenar los tubos de la tabla 1.
Preparar 5 mL y llenar los tubos de la tabla 1.
Dejar reposar 10 minutos y agregar 0,4 mL de agua destilada a los tubos impares.
Dejar reposar 10 minutos y agregar 0,4 mL de agua destilada a los tubos impares.
Agregar 0,2 mL de EDTAcon 0,2 mL de cisteína a los pares.
Agregar 0,2 mL de EDTA con 0,2 mL de cisteína a los pares.
Mezclar y luego de 15 minutos realizar el ensayo de la actividad enzimática a cada uno
Mezclar y luego de 15 minutos realizar el ensayo de la actividad enzimática a cada uno
Registrar los resultados obtenidos.
Registrar los resultados obtenidos.
Tabla 1
Reactivos (mL) | 1 | 2 | 3 | 4 |...
INTRODUCCION
Las enzimas proteolíticas son las que ayudan a digerir las proteínas contenidas en los alimentos. Aunque el cuerpo produce esas enzimas en el páncreas, ciertos alimentos también contienen enzimas proteolíticas.
La papaya y la piña son dos de las fuentes de plantas más ricas, como se atestigua por su usotradicional como "ablandadores" naturales para la carne. La papaína y la bromelina son los nombres respectivos para las enzimas proteolíticas que se encuentran en estas frutas. Las enzimas que produce el cuerpo se llaman tripsina y quimotripsina.
El principal uso de las enzimas proteolíticas es como una ayuda digestiva para las personas que tienen problemas para digerir proteínas. Sin embargo, porrazones que son menos claras, las enzimas proteolíticas también parecen reducir el dolor y la inflamación.1
DIAGRAMAS DE FLUJO
1. Preparación de las soluciones enzimáticas
a. Jugo de papaya
Macerar 30 gr de papaya en un mortero y sin agregar agua
Macerar 30 gr de papaya en un mortero y sin agregar agua
Filtrar a través de doble gasa o de muselina
Filtrar a través de doble gasa o demuselina
Rotular el filtrado cómo solución enzimática 1.
Rotular el filtrado cómo solución enzimática 1.
b. Ablandador de carne
A 3 gr de ablandador de carne agregar 10 ml de agua destilada
A 3 gr de ablandador de carne agregar 10 ml de agua destilada
Mezclar y centrifugar
Mezclar y centrifugar
Separar el sobrenadante y rotular el filtrado cómo solución enzimática 2.Separar el sobrenadante y rotular el filtrado cómo solución enzimática 2.
2. Ensayo de la prueba enzimática
En un tubo de ensayo pipetear 0.5 mL de cualquiera de las soluciones enzimáticas.
En un tubo de ensayo pipetear 0.5 mL de cualquiera de las soluciones enzimáticas.
Agitando suavemente se nota el incremento de viscosidad.
Agitando suavemente se nota el incremento de viscosidad.Mezclar e incubar a 50°C hasta la formación del coágulo.
Mezclar e incubar a 50°C hasta la formación del coágulo.
Adicionar 3.0 mL de leche.
Adicionar 3.0 mL de leche.
3. Efecto de la concentración de la papaína
Marcar cuatro tubos de ensayo y preparar diluciones
Marcar cuatro tubos de ensayo y preparar diluciones
Notar que las diluciones quedan de 1, ½, ¼, y 1/8 respectivamente.Notar que las diluciones quedan de 1, ½, ¼, y 1/8 respectivamente.
Mezclar y transferir 0.5 mL al tubo descartando 0.5 mL de éste último
Mezclar y transferir 0.5 mL al tubo descartando 0.5 mL de éste último
Mezclar por inversión el contenido del tubo 2 y transferir 0.5 mL de este tubo al tubo 3
Mezclar por inversión el contenido del tubo 2 y transferir 0.5 mL de este tubo al tubo 3
Agregar 0.5mL de agua destilada a todos los tubos excepto al primero
Agregar 0.5 mL de agua destilada a todos los tubos excepto al primero
En los tubos 1 y 2 pipetear 0.5 mL de la solución enzimática 1
En los tubos 1 y 2 pipetear 0.5 mL de la solución enzimática 1
4. Inhibición de las sulfidril proteasas
De la mejor dilución que resultó la formación del coágulo, es decir mayor actividadenzimática.
De la mejor dilución que resultó la formación del coágulo, es decir mayor actividad enzimática.
Preparar 5 mL y llenar los tubos de la tabla 1.
Preparar 5 mL y llenar los tubos de la tabla 1.
Dejar reposar 10 minutos y agregar 0,4 mL de agua destilada a los tubos impares.
Dejar reposar 10 minutos y agregar 0,4 mL de agua destilada a los tubos impares.
Agregar 0,2 mL de EDTAcon 0,2 mL de cisteína a los pares.
Agregar 0,2 mL de EDTA con 0,2 mL de cisteína a los pares.
Mezclar y luego de 15 minutos realizar el ensayo de la actividad enzimática a cada uno
Mezclar y luego de 15 minutos realizar el ensayo de la actividad enzimática a cada uno
Registrar los resultados obtenidos.
Registrar los resultados obtenidos.
Tabla 1
Reactivos (mL) | 1 | 2 | 3 | 4 |...
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