Condromucoproteínas
Páginas: 8 (1955 palabras)
Publicado: 22 de septiembre de 2015
Localización de la condromucoproteína en el cartílago
G. Loevi, Canadá.
El anticuerpo contra la condromucoproteína del cartílago porcino fue empleado para colorar cortes del cartílago costal, articular y traqueal por el procedimiento de fluorescencia. Se compararon los resultados obtenidos la de la estafa de absorción del azul alciano en condiciones determinadas. Se demostró lapresencia de la condromucoproteína en el borde lacunar. En la matriz cercana la coloración fluorescente fue menos marcada, pero sí vio asociada mucha regiones estafadores particularmente interterritoriales. El azul alciano daba a veces posición opuesta a la producida por el método de fluorescencia: una coloración fuerte y bastante extensa, de la zona muy perilacunar pero débil en las regionesinterrelaciones territoriales.
Al tratar los cortes estafa hialuronidasa, la coloración fluorescente del anticuerpo sí volvía más intensa y más amplia, mientras que la absorpci6n del azul alciano cesaba. La acción de la hialuronidasa fue más marcada en cortes fijados. El efecto de la hialuronidasa avíale atribuirse a la degradación y a la eliminación del polisacárido, facilitando así el acceso delanticuerpo a la porción proteínica de la condromucoproteína. Las diferencias regionales de coloración pudieran deberse a una composición diferente del polímero condromucoproteínico en varios territorios o, quizás, a la propiedad del volumen excluido.
La localización histoquímica de polisacáridos de ácido implica dificultades de fijación y normalmente las reacciones de especificidad incierta. Por lotanto, la fase acuosa utilizada en la mayoría de los fijadores es susceptible de
Eluir al menos parte del material, mientras que la mayoría de reacciones de tinción carecen de especificidad. El último problema últimamente ha sido atacado con éxito por el uso de la técnica de azul alciano sal controlada (scott y dorling, 1965). El presente trabajo describe la aplicaciónde una técnica inmunohistoquímica a este problema. La condromucoproteína (cmp) en el cartílago fue detectada por la aplicación de anticuerpo dirigido contra esta sustancia. Las características inmunológicas de la reacción y la naturaleza del antígeno y el anticuerpo han sido totalmente descritos en otra parte (loewi y muir, 1965; muir, 1958). El antisuero contra cmp es predominantemente dirigido contra la parte proteica, por estarazón estudios paralelos se han llevado a cabo con la técnica de azul alciano para demostrar la acidez del polisacárido en la parte del complejo de cmp.
Material y Métodos
El cartílago fue tomado a partir de cerdos totalmente crecido inmediatamente después de la muerte en la masacre de la casa, incluyendo especímenes de cartílago costal, cartílago de la tráquea, y de articular cartílago dela articulación del tobillo. Partes de cada espécimen se congelaron instantáneamente en una mezcla de co2 sólido y etanol, y otra parte se fijó en etanol al 95 por ciento a 40 c. Algunas muestras fueron fijadas en una mezcla de 1 parte de 40 de formaldehido y 9 partes de etanol absoluto a -20 ° c. El material fijo fue subsiguientemente embebido en cera de parafina y se cortaron secciones a las 5. Elmétodo seguido con etanol frío es para que el tejido fuera fijado según sainte-marie (1962). El material no fijado, congelado fue cortado en un armario criostato y después se secó rápidamente antes de un tratamiento adicional.
Secciones de aorta de cerdo fueron cortados por el etanol frío fijado en el tejido.
Tejido de embrión de cerdo se obtiene a partir de una camada en el útero.
Latinción fluorescente se realiza por la técnica sándwich. Anticuerpos contra el cartílago de la laringe cerdo cmp fueron
Obtenidos en conejos (loewi y muir, 1965). Este suero anti a una dilución de 1:5 en solución salina tamponada de coon´s fue aplicado a las secciones durante 30 min., seguido de lavado por 30 min. Después de esto, la fluoresceína conjugada de cabra-anticonejo gamma-globulina se...
Localización de la condromucoproteína en el cartílago
G. Loevi, Canadá.
El anticuerpo contra la condromucoproteína del cartílago porcino fue empleado para colorar cortes del cartílago costal, articular y traqueal por el procedimiento de fluorescencia. Se compararon los resultados obtenidos la de la estafa de absorción del azul alciano en condiciones determinadas. Se demostró lapresencia de la condromucoproteína en el borde lacunar. En la matriz cercana la coloración fluorescente fue menos marcada, pero sí vio asociada mucha regiones estafadores particularmente interterritoriales. El azul alciano daba a veces posición opuesta a la producida por el método de fluorescencia: una coloración fuerte y bastante extensa, de la zona muy perilacunar pero débil en las regionesinterrelaciones territoriales.
Al tratar los cortes estafa hialuronidasa, la coloración fluorescente del anticuerpo sí volvía más intensa y más amplia, mientras que la absorpci6n del azul alciano cesaba. La acción de la hialuronidasa fue más marcada en cortes fijados. El efecto de la hialuronidasa avíale atribuirse a la degradación y a la eliminación del polisacárido, facilitando así el acceso delanticuerpo a la porción proteínica de la condromucoproteína. Las diferencias regionales de coloración pudieran deberse a una composición diferente del polímero condromucoproteínico en varios territorios o, quizás, a la propiedad del volumen excluido.
La localización histoquímica de polisacáridos de ácido implica dificultades de fijación y normalmente las reacciones de especificidad incierta. Por lotanto, la fase acuosa utilizada en la mayoría de los fijadores es susceptible de
Eluir al menos parte del material, mientras que la mayoría de reacciones de tinción carecen de especificidad. El último problema últimamente ha sido atacado con éxito por el uso de la técnica de azul alciano sal controlada (scott y dorling, 1965). El presente trabajo describe la aplicaciónde una técnica inmunohistoquímica a este problema. La condromucoproteína (cmp) en el cartílago fue detectada por la aplicación de anticuerpo dirigido contra esta sustancia. Las características inmunológicas de la reacción y la naturaleza del antígeno y el anticuerpo han sido totalmente descritos en otra parte (loewi y muir, 1965; muir, 1958). El antisuero contra cmp es predominantemente dirigido contra la parte proteica, por estarazón estudios paralelos se han llevado a cabo con la técnica de azul alciano para demostrar la acidez del polisacárido en la parte del complejo de cmp.
Material y Métodos
El cartílago fue tomado a partir de cerdos totalmente crecido inmediatamente después de la muerte en la masacre de la casa, incluyendo especímenes de cartílago costal, cartílago de la tráquea, y de articular cartílago dela articulación del tobillo. Partes de cada espécimen se congelaron instantáneamente en una mezcla de co2 sólido y etanol, y otra parte se fijó en etanol al 95 por ciento a 40 c. Algunas muestras fueron fijadas en una mezcla de 1 parte de 40 de formaldehido y 9 partes de etanol absoluto a -20 ° c. El material fijo fue subsiguientemente embebido en cera de parafina y se cortaron secciones a las 5. Elmétodo seguido con etanol frío es para que el tejido fuera fijado según sainte-marie (1962). El material no fijado, congelado fue cortado en un armario criostato y después se secó rápidamente antes de un tratamiento adicional.
Secciones de aorta de cerdo fueron cortados por el etanol frío fijado en el tejido.
Tejido de embrión de cerdo se obtiene a partir de una camada en el útero.
Latinción fluorescente se realiza por la técnica sándwich. Anticuerpos contra el cartílago de la laringe cerdo cmp fueron
Obtenidos en conejos (loewi y muir, 1965). Este suero anti a una dilución de 1:5 en solución salina tamponada de coon´s fue aplicado a las secciones durante 30 min., seguido de lavado por 30 min. Después de esto, la fluoresceína conjugada de cabra-anticonejo gamma-globulina se...
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