Cultivo Celular

El cultivo celular es el proceso mediante el que células, pueden cultivarse en condiciones controladas. Las células de plantas crecen normalmente en suspensiones célulares en medio líquido o como cultivo de callos en medio sólido. El cultivo de células de plantas no diferenciadas y callos requiere del un adecuado balance de las hormonas de crecimiento vegetales auxina y citoquinina.Mantenimiento de células en cultivo
Las células se cultivan y mantienen a una apropiada temperatura y mezcla de gases. Las condiciones de cultivo varían ampliamente para cada tipo celular, Además de la temperatura y la mezcla de gases, el factor más comúnmente variado en los sistemas de cultivo es el medio de crecimiento. Las recetas para los medios de crecimiento pueden variar en pH, factores de crecimientoy la presencia de otros componentes nutritivos.
Manipulación de las células en cultivo
Al estar generalmente las células en continua división durante el cultivo, es normal que crezcan hasta ocupar toda el área o volumen disponible. Esto puede generar varios problemas:
• Agotamiento de los nutrientes del medio
• Acumulación de células necróticas
• Inhibición de la división celular porcontacto: los contactos entre células pueden desencadenar un arresto del ciclo celular
• Diferenciación celular promiscua provocada por los contactos intercelulares
Estos problemas pueden afrontarse mediante métodos de cultivo celular en esterilidad. El objetivo de estos métodos es evitar la contaminación con bacterias o levaduras que competirían con las células por los nutrientes y/o podrían infectary eliminar las células. Toda manipulación se lleva a cabo, típicamente, en una campana de flujo laminar para evitar la entrada de microorganismos contaminantes. También pueden añadirse antibióticos al medio de cultivo.
Ventajas y desventajes de los cultivos celulares
Los cultivos celulares tienen una serie de ventajas innegables, pero al mismo tiempo tienen desventajas que hay que tener enconsideración. Como ventajas podemos citar:
- Permiten un control preciso y fino del medio ambiente. En un cultivo se pueden controlar todos los factores del medio: Físico-químicos (pH, temperatura, presión osmótica, niveles de O2, CO2, tensión superficial...), y fisiológicos (hormonas, factores de crecimiento, densidad celular,...)
- Caracterización y homogeneidad de la muestra. Las células encultivo de una línea celular, o de una línea continua son homogéneas, con morfología y composición uniformes. Se pueden obtener con facilidad un número elevado de réplicas idénticas, con lo que se supera el grave problema de heterogeneidad
- Economía. Suponen una economía en el uso de reactivos o productos de control fitosanitario a estudiar pues al realizarse en volúmenes reducidos, y con un accesodirecto de las células al producto las concentraciones requeridas son mucho más bajas que en la planta completa.
- En cuanto a las desventajas del cultivo celular:
- Técnica sensible. El crecimiento de las células vegetales es mucho más lento que el de los contaminantes más habituales (hongos, levaduras, bacterias, micoplasmas...) y además dado que proceden de organismos pluricelulares sonincapaces de crecer en ausencia de una compleja mezcla de nutrientes Esto supone la necesidad de mantener las condiciones de asepsia en todo momento, lo cual es limitante a nivel tanto del instrumental requerido como del personal cualificado para su manipulación.

Cultivo de tejidos vegetales in vitro
es una técnica de reproducción en condiciones totalmente asépticas, en la que a partir de unpequeño segmento inicial de tejido es posible regenerar en poco tiempo miles o millones de plantas genéticamente iguales a la planta madre, cuando a este tejido le es aplicado un estímulo por medio de variables físicas y químicas controladas en un medio de cultivo.
A diferencia de las técnicas tradicionales de cultivo, esta poderosa herramienta permite la propagación de grandes volúmenes de plantas...