curva de calibracion


TEMA: “Curva de calibrado de p-nitrofenol”
NÚMERO DE LA PRÁCTICA: 1
1. INTRODUCCIÓN
“Una curva de calibrado es la representación de la respuesta de un análisis químico a cantidades conocidas, una disolución patrón o estándar, de analito”. Representa la respuesta de un método analítico de concentraciones conocidas del analito. Cuando existe una respuesta lineal, indica que la señalanalítica corregida es proporcional a la señal del analito. (Harris, 2003)
Las disoluciones blanco son preparadas con los mismos reactivos y disolventes con los que se han preparado los estándares, estas soluciones no se incluye el analito, representando de esta manera la respuesta del procedimiento a las impurezas o los elementos interferentes, que existen en los reactivos. La solución patrón oestándar es aquella que contiene concentraciones conocidas del analito, y la solución blanco o blancos son disoluciones que contienen todos los reactivos y disolventes usados, menos el analito. (Harris. 2003)
La espectrometría es un método de análisis en el que la relación que existe entre la absorción de luz parte del compuesto y su concentrado. Las mediciones dependen del compuesto y deltipo de absorbancia que tenga la misma para de esta manera poder medir, las muestras a estudiar se pueden encontrar en fase líquida, sólida o gaseosa. Cada sustancia posee su propio espectro de absorbancia, el cual es una curva que representa la cantidad de energía radiante absorbida por la sustancia en cada longitud de onda del espectro, siendo así que cada sustancia absorbe una cantidad deradiación que es distinta a la que absorbe otro compuesto. (Anónimo. Sf)
El p-Nitrofenol al igual que el orto-Nitrofenol son sustancias que principalmente se utilizan para reconocimiento de la presencia de residuos de pesticidas en plantas, dichos compuestos presentan espectros de absorción entre una zona de 200 nm a 500 nm.(Etchaverry, et al. 2012) El mismo que en su estructura química posee unresiduo orgánico unido a un grupo fosfato, en laboratorio es uno de los compuestos más utilizados para reconocimiento de la actividad enzimática.(Ruiz, et al. 2012)
El espectrómetro es un instrumento que analiza el espectro que emite una fuente, o que es absorbida por una sustancia que se encuentra en el camino de la luz que es emitida por la fuente; Los espectros son explicados como una huellade las sustancias que forman. El principio del espectrofotómetro está basado en la descomposición de la luz en las diferentes longitudes de onda que la componen por la refracción produciendo de esta manera una red de difracción. (Montiel, et al. 2010)

2. OBJETIVO GENERAL
Determinar una curva de calibrado utilizando el indicador para-Nitrofenol

3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Crear una curva decalibrado mediante los datos de absorbancia proporcionados por el equipo de espectrofotometría Fisher Scientific, S.L.
Conocer el espectro máximo de absorción del indicador p-nitrofenol.
Obtener el valor de R2 con el fin de conocer la tendencia de la curva de calibración.

4. MATERIALES Y MÉTODOS
- Materiales y reactivos
Agua destilada
Paranitrofenol (0,15 mM)
Micropipeta
Vasode precipitación de 100ml
Probeta de 100 ml
8 Celdas espectrofotométricas
Matraz aforado de 50 ml
7 tubos de ensayo
Equipo de Espetrofotometría (Fisher Scientific, S.L.)

- Procedimiento experimental
Inicialmente se añadió el paranitrofenol con agua destilada en un matraz aforado de 50 ml,
con el fin de diluir la solución y obtener una concentración de 0,15 mM de pNF, acontinuación se prosiguió a colocar los volumenes indicados, que se presenta en la Tabla1, en los siete tubos de ensayo, posteriormente se colocó 1ml de cada solución de los tubos en las siete celdas espectrofotométricas respectivamente, añadiendo una celda más que sólo contenía el paranitrofenol usada como control y finalmente se realiza la lectura de la absorbancia a 400nm; Usando como blanco la...