Curva de Calibrado

Páginas: 4 (782 palabras) Publicado: 22 de noviembre de 2013
1. Tema:
“Elaboración de la curva de calibrado con paranitrofenol”

2. Objetivos:

Determinar la curva de calibrado utilizando el indicador paranitrofenol.

Observar cual es el nivel deabsorbancia y comportamiento de la muestra a diferentes concentraciones.

3. Introducción:

El paranitrofenol es uno de los resultados de una nitración del fenol con ácido nítrico (Klages, F., 2006,p.740). Este es un indicador ácido-base, esto quiere decir que su reacción se dará dependiendo del pH de la solución, cambia de tono a amarillento no muy intenso en soluciones ácidas, debido a lasmoléculas que lo conforma como el fenol (ácido débil); mientras que al actuar en soluciones básicas, éste tiene un cambio de coloración más intenso. Su nivel de absorbancia es de 400 nm, y esta esfácilmente cuantificable (Dickerson, R., 1992, p.855).

La espectrofotometría UV-visible nos permite determinar la concentración de un compuesto cuando este se encuentre en solución. Las moléculas absorbenlas radiaciones electromagnéticas emitidas por el espectrofotómetro donde se puede seleccionar la longitud de onda de la luz con la que se desea trabajar que pasa por la muestra y se mide lacantidad de luz absorbida de igual forma por la muestra (Abril, N. et al., s/f).

Se lo emplea en ensayos de espectrofotometría, para medir la absorbancia de una enzima al ser hidrolizada por esteindicador (se observa principalmente el pico de ésta) y también se lo utiliza en cromatografía de fase gaseosa (Bennington, J., 2000, p.1003).

Para obtener una curva de calibrado de una muestra sepreparan soluciones a diferentes concentraciones, donde se debe determinar el valor de absorbancia a λmax para cada una. Los valores de absorbancia se ubica en el eje de las x y los de concentración en eleje de las y. Se puede observar que cuando existen bajas concentraciones, el aumento de concentración corresponde con un incremento lineal en la absorbancia. Pero cuando se tiene concentraciones...
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