diagnostico serologico de VIH

CAPITULO 4: DIAGNOSTICO SEROLÓGICO DE LA INFECCIÓN POR VIH
Los retrovirus como patógenos humanos han sido reconocidos en los últimos 20 años, si bien se conoce hace más de un siglo como causales de enfermedades en animales.
Los primeros exámenes de detección de infección por el VIH fueron puesto en practica en 1985, a través de técnicas de análisis inmunoenzimático (ELISA), sin embargo,presentaban serios problemas de especificidad y una alta frecuencia de resultados falsos reactivos cuando se aplicaron a poblaciones de bajo riesgo de donantes de sangre.
Por ello se desarrollaron técnicas suplementaria o de confirmación que permitieron confirmar los resultados reactivos por la técnica de ELISA.
En consecuencia los exámenes para descartar anticuerpos anti-VIH los podemosactualmente clasificar en exámenes de:
A) Detección o tamizaje: que han sido diseñados basados en su alta sensibilidad con el fin de detectare a todos los individuos infectados.
B) Confirmación: los cuales manteniendo una alta sensibilidad poseen una alta especificidad y así permiten descartar los resultados falsos reactivos por ELISA.
Estas pruebas de laboratorio se aplican de manera secuencial por loque permiten finalmente obtener resultados confiables y precisos cuando se aplican con fines de diagnostico o para el tamizaje de donantes de sangre.



4.1 PERIODO DE VENTANA
Las técnicas de ELISA actuales que utilizan péptidos y proteínas recombinantes detectan los anticuerpos en promedio a las 3 semanas desde el dia de la exposición a la fuente contaminante.asi también existe una técnicade ELISA combinada que ha incorporado la detección del antígeno p24 simultáneamente con la detección de anticuerpos lo que reduce el periodo de ventana a dos semanas. Estudios recientes demuestran que aplicando técnicas moleculares de ácidos nucleícos este periodo puede reducirse a solo 10 días. Por lo tanto se espera que la mayoría de individuos sean detectados dentro de las primeras 3 semanaspost-infección.

4.2 TECNICAS DE DETECCION DE ANTICUERPOS
Es el diagnostico de laboratorio de la infección por el VIH es fundamental demostrar la presencia de anticuerpos específicos contra antígenos virales. En la actualidad estos antígenos se obtienen mediante proteínas recombinantes o fabricación de péptidos sintéticos de las regiones mas inmunogeneticas y constantes de las proteínasexpresadas por el genoma viral, y por lo tanto, con una lata sensibilidad diagnostica y aceptable especificidad.
Esta técnica permite detectar anticuerpos específicos para los antígenos sintetizados. Estos son pegados en el soporte solido que corresponda (pocillo o microesfera) con un alto grado de pureza y por lo tanto evitan reacciones inespecíficas a contaminantes, como sucedió con las técnicasantiguas en el que el antígeno se obtenía por cultivo celular (1° generación).
Existen mas de 140 técnicas de ELISA de al menos 40 empresas dedicadas al diagnostico de VIH. En los EEUU estas técnicas deben estar aprobadas por la FDA.
Las técnicas ELISA son las más ampliamente utilizadas en la detección de la infección por el VIH por su gran sensibilidad, su metodología operacional simple y sucapacidad de automatización lo que permite entregar resultados con alta precisión y confiablidad.
Recientemente se ha incorporado la metodología tipo sándwich en la cual el antígeno de VIH es conjugado a una enzima, similar al antígeno inmovilizado en la fase solida.
Entonces los anticuerpos si existen en la muestra se unen a ambos antígenos. Luego la adición del sustrato resulta en desarrollo decolor que es proporcional a la concentración del anticuerpo. Se considera que este método es el mas sensible dado por si capacidad de detectar todos los isotipos de anticuerpos incluyendo IgM. Además algunas empresas han incorporado la detección del antígeno p24 en el mismo formato, lo que permite una detección no solo de anticuerpos VIH, si no también parte del virus, elemento importante a...