Dinámica poblacional





































INTRODUCCIÓN

A pesar del enorme desarrollo tecnológico que ha tenido lugar en los laboratorios científicos, el conteo visual con hematocitómetro sigue siendo el método de conteo más extendido desde el siglo XIX.
Para resolver el problema de conteo celular, se ha optado, en algunos casos por calibrar sistemas de absorciónespectrofotométricos, cuyos fundamentos se finca en las propiedades de absorción de la luz por parte de las células; sin embargo, tales sistemas son poco exactos y los resultados que se obtienen son difíciles de repetir. Una alternativa a este problema es contar directamente el número de células presentes en un volumen conocido; esto puede ser un trabajo agobiante si consideramos, por ejemplo, alas células procariontes que miden generalmente menos de 10 micras y por lo tanto se pueden encontrar muchas en un volumen muy pequeño. No obstante, se cuenta con la cámara de Neubauer, la cual es un instrumento muy útil que permite contar células de distintos tamaños.
El hemocitometro tiene la apariencia de un porta objetos gruesos, que en una cara tiene una placa muy delgada de metal, la cualse encuentra grabada con un par de cuadriculas muy finas y de medidas definidas .Esta cámara cuenta también con un par de muescas que permiten colocar la muestra a analizar en dos compartimentos. Por último, la cámara de neubauer se complementa con un cubreobjetos cuyo grosor es mayor, también que el cubre objetos convenientes.
















OBJETIVOS

GENERALES:
Conocer yrealizar un conteo celular con el uso correcto de una cámara de neubauer; y realizar los cálculos necesarios para estimar el número celular de una suspensión celular.
ESPECIFICOS:
Observar la diferencia de la ruta metabólica seguida por la célula entre la respiración y la fermentación de acuerdo a las condiciones ambientales enfrentadas.

Notar las fases de crecimiento poblacional en la muestrade cada biorreactor y hablar de cada una de ellas.



















MATERIALES Y MÉTODOS

Microscopio compuesto
Cámara de neubauer
Biorreactor de tanque agitado-aireado y de tanque agitado
Levadura seca comercial y de cerveza
Jugo de caña
Micro pipeta



1° Agregar 500 ml de jugo de caña a cada biorreactor y luego 2 gr de levadura a cada uno, luego encender losbiorreactores.
2° Extraer 1 ml de la muestra de cada biorreactor colocarlo en un tubo de ensayo; agregar 9 ml de agua en el tubo de ensayo y mezclar hasta que se muestre homogéneo.
3° Sacar una pequeña muestra del contenido del tubo de ensayo y colocarla en la cámara Neubauer, evitando la formación de burbujas, para observar la dinámica de poblaciones de las levaduras.
4° Seguidamente colocar lacámara en la platina del microscopio y observarla con el objetivo de 10x.
En caso de que la muestra sea muy aglomerada se realizaran diluciones; para así poder observar más claramente.
5° Localizar las cinco cuadros de la cámara en los cuales se realizara el conteo.
6° Se realiza el conteo, se saca el promedio de los datos y se lo multiplica por 250 000 para así determinar el número decélulas.
En caso de haberse realizado diluciones será necesario multiplicarlo por un 10n; donde n es el número de diluciones.





RESULTADOS:





TABLA DE CONTEO





HORA
PROMEDIO (TAA)
PROMEDIO (TA)
RECUENTO-- TAA (lev/ml)
RECUENTO-- TA (lev/ml)
ANALISTA






01:00
56
55.4
1.4 x 107
1.38 x 107
Omar
01:30
178.2
145.8
4.5 x 107
3.6 x 107
Daniel y Kevin
02:0021
16.8
5.2 x 107
4.2 x 107
Martín
02:30
82
68
2.5 x 107
2 x 107
José Miguel
03:00
85
59
2.1 x 107
3.2 x 107
Liduvina y Tenorio
03:30
164.5
156.5
4.1 x 107
3.9 x 107
Jack
04:00
  17.2
  16.6
 2,2 x 107
 2,0 x 107
Jean Paul y Juan Manuel
  04.30
23.4
33.8
5.58 x 107
8.45 x 107
Betsy y Mónica
05:00
23
32.2...