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Lambda DNA/HindIII Marker
(Ref. 31.011)Concentración: 0.5 mg/ml (50 µg)
Conservar a -20ºC
Descripción
El Lambda DNA/HindIII Marker se obtiene a partir de ADN del fago λ digerido
con HindIII hasta generar bandas entre 0.125 kb y 23 kb,aptas para ser
utilizadas como marcadores de peso molecular en geles de agarosa. Este
marcador se compone de 8 fragmentos de ADN individuales purificados (en
pares de bases): 23130*, 9416, 6557,4361*, 2322, 2027, 564 y 125.
bp
23130*
9416
6557
4361*
2322
2027
564
125
Lambda DNA/HindIII Marker
0.5µg/carril
gel de agarosa al 1%
teñido con bromuro de etidio
Nota: *Losextremos cohesivos de los fragmentos de 23130 bp y 4361 bp (marcados*)
pueden unirse y formar una banda adicional de 27491 bp. Para separar estos fragmentos
calentar 5 min a 65 °C y luego enfriar enhielo durante 3 min.
Buffer de Almacenamiento (Buffer TE)
Tris-HCl (pH 7.6) 10 mM, EDTA 1 mM
Almacenamiento
Almacenar a -20ºC. Para uso frecuente y a fin de evitar ciclos decongelación/descongelación se recomienda realizar alícuotas, o bien
almacenar a 4ºC en presencia de buffer de carga (estable durante 4 meses).
Protocolo de uso
1- Preparar la siguiente mezcla (para carriles de 5 mmde longitud+):
•
•
•
Lambda DNA/HindIII Marker 1 µl (0.5 µg)
Buffer de carga 6X
1 µl
Agua destilada
4 µl
2- Mezclar suavemente
3- Calentar a 65 °C durante 5 min y luego enfriar 3 min enhielo*
4- Cargar la totalidad de la mezcla en el carril del gel de agarosa
5- Visualizar por tinción con broumuro de etidio o con SYBR® Green I
+
La mezcla debe ser escalada en función delancho del carril. Utilizar
aproximadamente 0.1 µg de ADN/mm del carril.
Si bien el Lambda DNA/HindIII Marker no está diseñado para la
cuantificación precisa del ADN, puede utilizarse para una...
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