ENFERMERIA

EXPERIMENTO No. 1

HIDRÓLISIS DE CARBOHIDRATOS



OBJETIVOS

a) Realizar la hidrólisis e inversión de la sacarosa y comprobar ésta mediante pruebas químicas y utilizando un polarímetro.
b) Hidrolizar almidón, que es un polisacárido, y comprobar su hidrólisis mediante pruebas químicas.

ANTECEDENTES

1. Formación de acetales (adición de alcoholes a carbonilos).
2. ¿Quégrupo funcional está presente en los azúcares reductores y por qué se les da este nombre?
3. Mencione algunos de los reactivos oxidantes más empleados en el análisis de azúcares.
4. Ejemplos y definición de disacáridos y polisacáridos.
5. Reacción de hidrólisis ácida que experimenta la sacarosa y el almidón y productos que se forman.
6. ¿Cuál es la diferencia estructural entre el “almidónsoluble” y el “almidón insoluble”?
7. ¿Cuál es la causa del color que se produce entre el almidón y el yodo?
8. Partes fundamentales de un Polarímetro.
9. Consultar la FEUM 8ª. MGA. Rotación específica y rotación óptica.

MATERIAL

15 Tubos de ensayo. 1 Espátula.
1 Pipeta de 5 mL. 1 Probeta de 25 mL.
1 Erlenmeyer de 125 mL. 1 Vaso de pp. de 400 mL.
1 Gradilla. 1 Pinzas p/tubo deensayo.
1 Vidrio de reloj. 1 Mechero c/manguera.
1 Anillo metálico. 1 Tela de alambre c/asbesto.
1 Recipiente eléctrico Baño María. 1 Pinza de 3 dedos c/nuez.
1 Recipiente de peltre. 1 Pipeta de 1 mL.
1 Polarímetro.

REACTIVOS

10 mL Solución de sacarosa al 10 %. 1 mL Fenolftaleína en solución.
1 mL Solución de HCl al 20% preparada por el profesor. 5 mL Reactivo de Fehling.
5 mLSolución de NaOH al 2 %. 10 mL Reactivo de Benedict.
2 mL Reactivo de yodo-yoduro. 2 g Almidón soluble.
3mL HCl concentrado. 2 mL NAOH al 2%.

PROCEDIMIENTO

1- Hidrólisis de la sacarosa (inversión)

Coloque en un tubo de ensaye 3 mL de una disolución de sacarosa al 10 %, agregue 0.5 mL ácido clorhídrico al 20 % (Nota1) y caliente en baño maría durante 10 minutos.
Enfríe la disolución yneutralice con cuidado y lentamente con NaOH al 2% usando Fenolftaleína como indicador (o bien puede utilizar papel pH).
Divida la disolución en 2 partes iguales y haga las siguientes pruebas:

-Prueba de Fehling. Mezcle 1 mL de la disolución A* y 1 mL de la disolución B* en un tubo de ensayo, agregue una parte de la disolución de sacarosa invertida y caliente a ebullición (Nota2). Haga la mismaprueba para una muestra de la disolución de sacarosa al 10%.
Observe y anote sus resultados.

-Prueba de Benedict. Coloque 1 mL de la disolución de Benedict y agregue 3 gotas de la disolución de sacarosa invertida, caliente a ebullición y deje enfriar a temperatura ambiente, (Nota3).
Haga la misma prueba para una muestra de la disolución de sacarosa al 10%, observe y anote sus resultados.2- Determinación de la rotación específica de la sacarosa y del azúcar invertido

Prepare una disolución con 1 g de sacarosa en 10 mL de agua destilada, y úsela para llenar el tubo del polarímetro de modo que no queden burbujas. Identifique este tubo con la letra A y mida su rotación óptica.
Prepare otra disolución con 1g de sacarosa en 10 mL de agua destilada y 4 mL de HCl al 20 %, y úsela parallenar otro tubo del polarímetro identificado con la letra B. Posteriormente determine su rotación óptica (Nota4).
Por último, llene un tercer tubo con una mezcla de las disoluciones A y B en proporción de 40:60 y mida la rotación óptica.

Cálculo:

Para calcular la rotación específica de sus azúcares tome en cuenta la siguiente información: el ángulo de rotación específica depende delespesor y concentración de la muestra, de la longitud de onda del rayo incidente y también, aunque en menor grado, de la temperatura del disolvente utilizado. De modo que la rotación específica [*] de una sustancia se expresa de la siguiente forma:


Donde * representa los grados de rotación medidos en el polarímetro; t es la temperatura; * es la longitud de onda, generalmente se usa la línea D...