Esterilizacion

PRACTICA No 3

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

INTRODUCCIÓN
La esterilización es un proceso mediante el cual se elimina por remoción o muerte todos los organismos viables de un objeto, superficie o medio. Un objeto libre de cualquier forma de vida se dice que esta estéril. El concepto de esterilización es absoluto, es decir no existe un material casi, más o menos, o 99% estéril.
En el trabajo deun laboratorio de microbiología es necesario que todo el material como pipetas, tubos de ensaye, cajas petri de vidrio o de plástico, medios de cultivo y soluciones estén estériles. Debe cuidarse que el material esterilizado se conserve estéril. Así, antes de esterilizarse, a los matraces, tubos y demás recipientes se les pone un tapón de algodón que evitará el acceso de microorganismos delambiente al interior. También es necesario proteger este tapón con papel para tratar que no se humedezca con agua de condensación después de esterilizar con calor húmedo. Algunos laboratorios utilizan tapones de plástico o metálicos en lugar de algodón con la misma finalidad.
Existen varios métodos físicos y químicos de esterilización, la selección de uno o de otro depende de la naturaleza delmaterial que se piensa esterilizar. Por ejemplo, la esterilización con calor húmedo, generalmente se realiza en un autoclave a 121°C durante 15 minutos, la temperatura se alcanza utilizando vapor de agua a una presión de 15 lb/pulg2 (2 atms). Estas condiciones de esterilización con calor húmedo puede variar de acuerdo con el volumen, tipo del autoclave y naturaleza del material por esterilizar.
LOSRECIPIENTES QUE SE ESTERILIZAN EN EL AUTOCLAVE NO DEBEN ESTAR HERMÉTICAMENTE CERRADOS.
La muerte de los organismos contaminantes ocurre principalmente por desnaturalización de las macromoléculas (proteínas, RNA y DNA) y coagulación de proteínas.
La esterilización con calor seco se usa principalmente para material de vidrio y materiales sólidos estables al calor, la cual requiere de mayor duracióne intensidad porque la conducción del calor es menos rápida que un ambiente húmedo. La temperatura que se utiliza es generalmente entre 160 y 180° C durante 1.5 horas. Las cajas petri de vidrio y las pipetas se colocan en cilindros de metal con aberturas que permiten el paso del aire caliente. La inactivación de los contaminantes ocurre por pérdidas de agua y oxidación de todos sus componentesesenciales.



La filtración a través de membranas se usa para esterilizar soluciones de sustancias termolábiles en donde los microorganismos son detenidos en el filtro. El filtrado estéril debe recibirse en un recipiente también estéril. Los virus y algunos tipos de bacterias muy pequeñas como Bdellovidrio, rickettsias, clamidias y algunas espiroquetas atraviesan esos filtros de membrana.Métodos físicos
Calor
Húmedo
Vapor a presión (autoclave)


Seco
Aire caliente (horno)



Flameado



Incineración

Filtración
Discos de membranas

Radiaciones
No ionizante
Rayos ultravioleta



Rayos infrarrojos


Ionizante
Rayos X



Rayos  (Cobalto-60)
Métodos químicos
Gases
Oxido de etileno

líquidos
Formaldehído, -propiolactona

En las campanas de flujo laminar que se usan como áreasestériles en el trabajo microbiológico, el aire se esteriliza por filtración a través de mallas de fibras de diversos materiales (filtros absolutos). Para el control de la contaminación proveniente del aire en especias limitados, se ha usado la realización ultravioleta, pero su escaso poder de penetración solo se le ha usado para esterilización de superficies y laminas muy delgadas de agua transparente,incolora y sin exceso de sales de fierro. El gas de óxido de etileno y las radiaciones ionizantes son utilizados para esterilizar material de plástico sensible al calor, porque este gas difunde fácilmente a través de polietileno, papel y cartón. Por esta razón se han usado radiaciones ionizantes como las del cobalto 60 para esterilizar artículos de plástico ya envueltos, como las jeringas...