estrafilococos
Páginas: 9 (2136 palabras)
Publicado: 14 de abril de 2014
Resumen
Se propuso obtener un producto óptimo, donde se incrementara la velocidad de crecimiento y la diferenciación de los microorganismos en el medio, como resultado de la combinación adecuada de los nutrientes. La rapidez en la identificación y caracterización de un agente infeccioso contribuye a aplicar al paciente una terapia adecuada. El agar manitol salado es un medio altamente selectivopara el aislamiento primario de estafilococos patógenos, cuya composición incluye el alcohol polihidroxílico (manitol). Este sustrato permite la identificación de estafilococos coagulasa-positivos pertenecientes fundamentalmente a la especie Staphylococcus aureus, por su capacidad de fermentar el manitol, característica que ha sido considerada como un índice de patogenicidad. Se realizaronmodificaciones en la formulación del medio agar manitol salado, obteniéndose un producto similar al medio de referencia, con características físico-químicas y microbiológicas superiores, sin presentar diferencias significativas (p> 0,05) en comparación con el producto de referencia utilizado.
Palabras clave: Staphylococcus, identificación, aislamiento, medio de cultivo.
Los medios de cultivodesempeñan un papel primordial en el diagnóstico clínico de enfermedades y en la higiene alimentaria. Los nuevos microorganismos reconocidos como agentes patógenos exigen mayores requisitos respecto a la especificidad y sensibilidad de diagnóstico, por lo que se hace difícil lograr un producto para la caracterización rápida e identificación de estos. Es esencial, por ello, el uso de medios decultivo primarios adecuados y de respuesta rápida, para lograr así el aislamiento óptimo de los microorganismos.1
El agar manitol salado es un medio selectivo usado para el aislamiento de estafilococos patógenos, especialmente Staphylococcus aureus, considerado un patógeno bacteriano serio desde que desarrolló resistencia a la penicilina en 1950.1 El agar manitol salado ha sido empleado también enestudios de resistencia a antibióticos, en los cuales ha demostrado una especificidad de 98,1 % y una sensibilidad de 95,1 % con cepas de Staphylococcus oxacillina resistentes.2
El agar manitol salado incluye en su composición el indicador de pH: rojo fenol. Este indicador es de color rojo a pH 8,2 y cambia a amarillo a pH por debajo de 6,8. Cuando se desarrollan las colonias de Staphylococcusaureus fermentadoras de manitol, se produce ácido en el medio, el cual reacciona con el indicador y forma las áreas de color amarillo alrededor de las colonias, reacción característica de los estafilococos patógenos.3
Sin embargo, la alta concentración del indicador puede afectar la calidad del medio de cultivo porque la mayoría de estos indicadores son tóxicos para los microorganismos. Además,la cantidad excesiva de indicador sulfoftaleínico (como el rojo fenol) proporciona al medio de cultivo una capacidad de buffer adicional y disminuye la difusión de los ácidos metabólicos. Por otra parte es necesario que el medio de cultivo posea una adecuada composición de bases nutritivas para contrarrestar el efecto inhibitorio de la alta concentración de cloruro de sodio y lograr una rápida yeficiente recuperación de estafilococos.
Por todo lo anterior mencionado y en respuesta a las exigencias actuales del diagnóstico microbiológico, se decidió realizar modificaciones a la formulación original del medio agar manitol salado, buscando mayor velocidad en la identificación.
Métodos
Las variables para la optimización de la formulación del medio fueron la composición de basesnutritivas y la concentración de colorante.
Para realizar las diferentes variantes a escala experimental se emplearon bases nutritivas obtenidas en BioCen (Cuba) e ingredientes de QueLab (Canadá) (D-manitol, cloruro de sodio, rojo fenol, agar), además del medio de referencia: agar manitol salado QueLab (lote: 23181743) y agar para conteo en placa QueLab (lote: 21071742). Se evaluaron 5 variantes...
Se propuso obtener un producto óptimo, donde se incrementara la velocidad de crecimiento y la diferenciación de los microorganismos en el medio, como resultado de la combinación adecuada de los nutrientes. La rapidez en la identificación y caracterización de un agente infeccioso contribuye a aplicar al paciente una terapia adecuada. El agar manitol salado es un medio altamente selectivopara el aislamiento primario de estafilococos patógenos, cuya composición incluye el alcohol polihidroxílico (manitol). Este sustrato permite la identificación de estafilococos coagulasa-positivos pertenecientes fundamentalmente a la especie Staphylococcus aureus, por su capacidad de fermentar el manitol, característica que ha sido considerada como un índice de patogenicidad. Se realizaronmodificaciones en la formulación del medio agar manitol salado, obteniéndose un producto similar al medio de referencia, con características físico-químicas y microbiológicas superiores, sin presentar diferencias significativas (p> 0,05) en comparación con el producto de referencia utilizado.
Palabras clave: Staphylococcus, identificación, aislamiento, medio de cultivo.
Los medios de cultivodesempeñan un papel primordial en el diagnóstico clínico de enfermedades y en la higiene alimentaria. Los nuevos microorganismos reconocidos como agentes patógenos exigen mayores requisitos respecto a la especificidad y sensibilidad de diagnóstico, por lo que se hace difícil lograr un producto para la caracterización rápida e identificación de estos. Es esencial, por ello, el uso de medios decultivo primarios adecuados y de respuesta rápida, para lograr así el aislamiento óptimo de los microorganismos.1
El agar manitol salado es un medio selectivo usado para el aislamiento de estafilococos patógenos, especialmente Staphylococcus aureus, considerado un patógeno bacteriano serio desde que desarrolló resistencia a la penicilina en 1950.1 El agar manitol salado ha sido empleado también enestudios de resistencia a antibióticos, en los cuales ha demostrado una especificidad de 98,1 % y una sensibilidad de 95,1 % con cepas de Staphylococcus oxacillina resistentes.2
El agar manitol salado incluye en su composición el indicador de pH: rojo fenol. Este indicador es de color rojo a pH 8,2 y cambia a amarillo a pH por debajo de 6,8. Cuando se desarrollan las colonias de Staphylococcusaureus fermentadoras de manitol, se produce ácido en el medio, el cual reacciona con el indicador y forma las áreas de color amarillo alrededor de las colonias, reacción característica de los estafilococos patógenos.3
Sin embargo, la alta concentración del indicador puede afectar la calidad del medio de cultivo porque la mayoría de estos indicadores son tóxicos para los microorganismos. Además,la cantidad excesiva de indicador sulfoftaleínico (como el rojo fenol) proporciona al medio de cultivo una capacidad de buffer adicional y disminuye la difusión de los ácidos metabólicos. Por otra parte es necesario que el medio de cultivo posea una adecuada composición de bases nutritivas para contrarrestar el efecto inhibitorio de la alta concentración de cloruro de sodio y lograr una rápida yeficiente recuperación de estafilococos.
Por todo lo anterior mencionado y en respuesta a las exigencias actuales del diagnóstico microbiológico, se decidió realizar modificaciones a la formulación original del medio agar manitol salado, buscando mayor velocidad en la identificación.
Métodos
Las variables para la optimización de la formulación del medio fueron la composición de basesnutritivas y la concentración de colorante.
Para realizar las diferentes variantes a escala experimental se emplearon bases nutritivas obtenidas en BioCen (Cuba) e ingredientes de QueLab (Canadá) (D-manitol, cloruro de sodio, rojo fenol, agar), además del medio de referencia: agar manitol salado QueLab (lote: 23181743) y agar para conteo en placa QueLab (lote: 21071742). Se evaluaron 5 variantes...
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