Hematoxilina- eosina

Tinción Hematoxilina-Eosina… una observación microscópica posible.
Autor: Folmer Federico
Vía comunicación: E-mail: fedefo_06@hotmail.com

Resumen
El siguiente informe de laboratorio, tiene como principal tema de trabajo al estudio de células muertas de tejido dérmico de mandíbula de pez, a través de su tinción con colorantes orgánicos, como lo son la Hematoxilina-Eosina.
Para dichoproceso de tinción, fue necesario seguir un método postulado en el protocolo de histología, titulado Tinción Hematoxilina-Eosina, que nos guiaba paso a paso las acciones a realizar, indicándonos tanto el instrumental a utilizar, como los materiales y tiempos necesarios para dicho proceso.
A través del mismo observamos núcleos y materiales citoplasmáticos de las células.Introducción
Si bien es verdad que la Biología es una ciencia compleja y comprende una diversidad de áreas de estudios, hay una de ellas que es la más notable: la microscopía celular.
A mediados del siglo XIX, las técnicas microscópicas y los ensayos bioquímicos revelaron un mundo insospechado de organelas y estructuras complejas e interrelacionadas, que hasta el día de hoy no dejan desorprender.
Para adentrarnos en el mundo microscópico celular, realizamos una simple experiencia de laboratorio, basada en el estudio y observación de células muertas de tejido dérmico de mandíbula de pez, a través de su tinción con dos colorantes de contraste: Hematoxilina-Eosina.
Dicho trabajo es arribado, debido que al ser estudiantes en Biología, debemos observar detalladamente a la unidad básica dela vida: la célula. Al resultar ésta muy pequeña y dificultosa de estudiar, debido a su transparencia estructural, es necesario de hacerse de conocimientos en microscopía y de adquirir métodos y técnicas para la preparación y observación de células y tejidos.
Al ser la utilización de colorantes una de las técnicas más simples para aumentar el contraste y conseguir una buena diferenciación de lasestructuras biológicas, optamos por su manejo, específicamente por un tipo de tinción ordinaria muy utilizada en hispatología: la tinción de hematoxilina-eosina.
La tinción del corte tiene como principal objetivo el estudio de las características físicas del tejido, y las relaciones entre las células que lo constituyen; como así también el reconocimiento de los núcleos celulares y su materialcitoplasmático, resaltados mediante los colorantes orgánicos que se fijan a ellos según su afinidad.










Método experimental
Tinción Hematoxilina-Eosina
Material: tejido dérmico de mandíbula de pez.
1. Fijación: se fijan las células o tejidos con agentes que matan y estabilizan la estructura, lo más parecido posible en morfología y composición química al estado vivo.
Para ellose utiliza formol al 10%, durante 12 minutos.
2. Deshidratación: se realiza para que los espacios ocupados por el agua en el tejido, puedan ser ocupados por parafina. Para evitar una deshidratación brusca se utilizan alcoholes de graduación creciente.
Alcohol 70%, 2 horas mínimo.
Alcohol 96%, 4 horas.
Alcohol 100%, 4 horas.
3. Aclaración: se extrae el alcohol del tejido para su posteriorinclusión en parafina. Con este proceso los tejidos se transparentan.
Se utiliza xilol durante 4 horas.
4. Inclusión en parafina: se coloca el tejido fijado en una sustancia (parafina) que lo conserve y le de consistencia y volumen para poder cortarlo en secciones finas y delgadas.
Se coloca el parche en parafina fundida, en estufa a 60°C, durante 6 horas mínimo.
5. Confección del taco: colocarparafina en un molde de papel o metal, dejar que se forme la capa superficial fría, y colocar en agua fría para que se solidifique y se despegue del molde. Colocar en heladera hasta cortar.
Cabe aclarar que debido a razones de tiempo, los 5 pasos anteriores fueron llevados a cabo anteriormente por el profesor de la cátedra.
6. Cortes en micrótomo: colocar el taco de parafina en un taco de...