Histotecnologia

Colorantes Histológicos.
La hematoxilina y la eosina se utilizan en Histotecnología principalmente para poner en evidencia las características estructurales.
Cuando se desea estudiar los componentes celulares se utilizan métodos más selectivos, como coloración con orceína y fucsina-resorcina para el material elástico y la impregnación argéntica para las fibras reticulares y membranas basales.Pese a que el fundamento químico de muchos no siempre se comprende, estos procedimientos sirven. En cualquier caso, es más importante saber lo que el método permite observar, que conocer su mecanismo íntimo de acción.

Fibras elásticas teñidas de azul Helicobacter Piloris por
con orceína y fucsina-resorcina.tinción de plata Warthin-Starry

Los métodos histoquímicos y citoquímicos pueden tener su fundamento en la unión específica de un colorante, el uso de anticuerpos marcados con un colorante fluorescente dirigidos contra un componente celular en particular o la actividad enzimática inherente de un elemento constitutivo de las células.
Composición química de las muestrashistológicas.
Los componentes que perduran luego de la fijación son principalmente moléculas grandes que no se disuelven con facilidad: complejos macromoleculares grandes:
* Nucleoproteínas, formadas por ácidos nucleicos unidos a proteínas.
* Proteínas intracelulares del citoesqueleto, en complejo con otras proteínas.
* Proteínas extracelulares, en grandes aglomeraciones insolubles, en las quemoléculas vecinas semejantes se unen a través de enlaces cruzados, como ocurre en la formación de las fibras colágenas.
* Complejos de fosfolípidos y proteínas (o carbohidratos) en las membranas.
Muchos componentes de los tejidos desaparecen durante la preparación de los cortes teñidos con H-E. A pesar de que la mayor parte de los ácidos nucleicos, las proteínas y los fosfolípidos seconservan en los cortes histológicos, muchos también se pierden; por ejemplo, los solventes orgánicos utilizados durante la técnica histológica suelen disolver los lípidos neutros. Los que se pierden durante la fijación de rutina en fijadores acuosos son:
*
* Glucógeno (carbohidrato de almacenamiento intracelular común en el hígado y las células musculares)
* Proteoglucanos yglucosaminoglucanos (carbohidratos complejos extracelulares hallados en el tejido conjuntivo)
Colorantes ácidos y básicos.
Un colorante ácido, como la eosina, tiene una carga neta negativa en su parte coloreada con la fórmula general (Na+ anilina-)

Un colorante básico, como el azul de metileno, tiene una carga neta positiva en su parte coloreada y se describe con la fórmula general (Anilina+Cl-)

Desde elpunto de vista estructural la hematoxilina no es un colorante básico, pero tiene propiedades tintoriales muy semejantes a las de las anilinas básicas.

El color de una anilina no se relaciona con el hecho de que sea ácida o básica.

Colorante | Color |
Colorantes Básicos | |
Verde de metilo | Verde |
Azul de metileno | Azul |
Pironina G | Rojo |
Azul de toluidina | Azul |Colorantes Ácidos | |
Fucsina ácida | Rojo |
Azul de anilina | Azul |
Eosina | Rojo |
Naranja G | Naranja |

Los colorantes básicos reaccionan con los componentes aniónicos de las células y los tejidos (componentes que tienen una carga neta negativa). Entre los componentes aniónicos se encuentran los grupos fosfatos de los ácidos nucleicos, los grupos sulfatos de los glucosaminoglucanos ylos grupos carboxilo de las proteínas.


Tinción de ácidos nucleicos con verde de metilo y pironina G.
La capacidad de estos grupos aniónicos de reaccionar con una anilina o colorante básico se denomina basofilia (afinidad por lo básico). Los componentes del tejido que se tiñen con la hematoxilina también exhiben basofilia.

Tinción de ulcera...