hjbjl

Això posa en relleu una de les principals avantatges del sistema de cèl lules de baculovirus d'insectes per a la producció de proteïnes recombinants. Una nova millora de rendiment VLP s'espera en una configuració de bioreactor de cèl · lules d'insecte optimitzat en gran escala (Vicente et al., 2011).
La vacunació amb les subunitats CHIKV-E1 i E2-només va protegir parcialment ratolinsIFN-knockout de desafiament CHIKV letal. La VLP induir una resposta immune protectora completa després d'una sola immunització, amb importants títols d'anticossos neutralitzants superiors en comparació a quan es tracta de subunitats (Capítol 5). La mida de partícula, la presentació d'antigen repetitiu i plegament de proteïnes més probable explicar la immunogenicitat reduïda de les dades subunits.Theseindividuals suggereixen que fins i tot una resposta immune neutralitzant suau és suficient per protegir els ratolins contra la infecció letal. No obstant això, les VLP són coneguts per activar tant de cèl · lules B intervinguda i respostes de cèl · lules T citotòxiques (Noad i Roy, 2003). Això pot explicar els resultats de la comprovació del CHIKV VLP en un model de ratolí salvatge de tipus adult(Capítol 6) (Gardner et al., 2010). Una sola immunització amb 1 g de VLP no adyuvada ratolins protegits contra la infecció CHIKV i símptomes de la malaltia d'artritis. A més, i en contrast amb el que es va trobar anteriorment (Gardner et al., 2010), el VLP va induir una resposta IgG1-IgG2c equilibrada. La dosi d'antigen requerit per a la protecció completa, pot més probable és que es pot reduir encaramés, especialment en combinació amb un adjuvant potent. Això augmentaria el nombre de dosis.
Diversos sistemes d'expressió o de producció, com ara bacteris, llevats o cèl · lules de mamífers són adequats per a la producció de VLP. No obstant això, l'elecció del sistema d'expressió apropiat es restringeix si estan embolicats VLP o estan compostos per exemple, glicoproteïnes. L'expressió en cèl ·lules d'insecte usant baculovirus recombinants, té molts avantatges sobre altres sistemes d'expressió i l'expressió segueix sent una plataforma versàtil i robust per a la producció de VLP. En la investigació actual, CHIKV VLP van ser produïts en cultius de cèl · lules Sf21 monocapa, que no és una configuració adequada per a la producció a gran escala. No obstant això, les cèl · lules d'insectestenen taxes de creixement ràpid en els mitjans de cultiu lliures de proteïnes lliure de sèrum i i són perfectament adaptable al creixement en cultiu en suspensió (O'Reilly et al., 1993). Això fa que aquestes cèl · lules molt adequat per als processos anteriors a gran escala, com ara la producció de VLP. L'escala de producció apropiat depèn en gran mesura del rendiment de la producció de VLPespecífic, que pot variar de 0,2 mg / l de coronavirus de la SARS VLP (Mortola i Roy, 2004) a 662 VLP de rotavirus mg / l (Vieira et al., 2005). El major rendiment de CHIKV-VLP, 40 mg / L, es deriva d'un cultiu en suspensió de 30 ml. Es va demostrar que 1 g de VLP
(E2-equivalents) és suficient per proporcionar una protecció completa en ratolins. No obstant això, els nivells necessaris per induir laprotecció en l'home d'antigen, poden en aquesta etapa només poden estimar en base de la comparació amb altres vacunes humanes contra els virus amb embolcall, com ara FluBlok ® (Protein Science Corp) Aquesta vacuna de la grip trivalent es compon de 45 g de cada un dels en total de tres tipus d'hemaglutinina recombinant (RHA) subunitat de la proteïna de diferents soques d'influenza (Treanor et al.,2007). Si se suposa que nivells similars d'antigen CHIKV-VLP que es requereix per
proporcionar protecció en l'home, això indicaria que aproximadament 440.000 dosis es poden derivar d'un bioreactor L 500. No obstant això, aquestes xifres no són representatives dels rendiments que s'arribarà després del processament aigües avall estrictes per, per exemple eliminar i inactivar partícules de...