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PRÁCTICA: Confirmación de Rh negativo

INTRODUCCIÓN
En caso de requerirse una transfusión sanguínea, solo se determina el Ag D de forma rutinaria, dada su mayor inmunogenicidad. Por lanaturaleza proteica del Ag, los Abs inducidos son de clase IgG que pueden atravesar placenta y causar hemólisis intrauterina en caso de incompatibilidad materno-fetal.
APARATOS

1.Centrífuga
2. Baño maríaa 370C

REACTIVOS

1. Solución salina  0.85%.
2. Dos tubos de ensaye
3. Suero de Coombs
4. Pipetas Pasteur
5. Pipeta serológica de 5 mL
6. Suero tipificador anti-D comercial
7. Tubo contapón de rosca





PROCEDIMIENTO

1.      Colocar con una pipeta Pasteur dos gotas de sangre en un tubo con tapón de rosca que contenga 2 ml de SS (suspensión aproximada de eritrocitos al 5%).2.      Marcar dos tubos, uno como Rh y otro como testigo. Colocar en cada uno una gota de eritrocitos.
3. Agregar al primer tubo (Rh) una gota de suero anti-D no diluido y agitar suavemente.      4. Agregar al segundo tubo (testigo) una gota de SS y agitar suavemente.
5. Centrifugar ambos tubos durante 60 seg a 1000 rpm.
6. Buscar la presencia de aglutinación, primero en el testigo ydespués en el otro tubo. Si el resultado es NO aglutinación, incubar ambos tubos a 37 grados C durante 20 min.
7. Lavar 3 veces con SS centrifugando a 1500 rpm durante 2 min. Después de la últimacentrifugación desechar el sobrenadante y agregar al paquete celular dos gotas de suero de Coombs.
8. Resuspender suavemente el paquete celular y centrifugar ambos tubos a 1000 rpm durante 60 seg.RESULTADOS
Buscar presencia de aglutinación. La presencia de aglutinación en el tubo marcado como Rh en el punto 6 del método, indica que el individuo es Rh (+). Si la aglutinación se encuentra en el tubomarcado como Rh sólo después de haber completado el método, este individuo corresponde al fenotipo D débil. Si en este tubo no hay aglutinación, este individuo es Rh negativo. El tubo marcado como...