inmunohematologia

BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA
DE PUEBLA


FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

LICENCIATURA: QUIMICO FARMACOBIOLOGO

Área de Análisis Clínicos

LABORATORIO DE HEMATOLOGIA III

HORAS PRACTICA: 3 TOTAL DE CRÉDITOS: 0



Practica: Inmunohematología



Primavera 2013

DETERMINACIÓN DEL GRUPO SANGUÍNEO Y SUIMPORTANCIA EN LA TRANSFUSIÓN SANGUINEA

INTRODUCCIÓN: La sangre se clasifica en diferentes grupos sanguíneos llamados A, B, AB y O.
El sistema inmunitario normalmente puede diferenciar las células sanguíneas propias de las células sanguíneas de otra persona. Si otras células sanguíneas entran al cuerpo, el sistema inmunitario puede producir anticuerpos contra ellas. Estos anticuerpos trabajaránpara destruir estas células que el sistema inmunitario no reconoce.
Otra manera como se pueden clasificar las células sanguíneas es por medio del factor Rh. Las personas que tienen factores Rh en su sangre se denominan "Rh positivos" y las personas sin este factor se denominan "Rh negativos". Las personas Rh negativas forman anticuerpos contra el factor Rh si reciben sangre Rh positiva.
La sangreque una persona recibe en una transfusión debe ser compatible con su propia sangre. Ser compatible significa que su cuerpo no producirá anticuerpos contra la sangre que reciba.
Hoy en día, toda la sangre se examina cuidadosamente. Los métodos modernos de laboratorio, al igual que los numerosos controles han ayudado a hacer que estas reacciones a las transfusiones sean muy raras.

OBJETIVO:Determinar el grupo sanguíneo y factor Rh y conocer su importancia en las transfusiones sanguíneas.

MATERIALES Y EQUIPO

1. Muestras de sangre con anticoagulante
2. Pipetas graduadas de 1 y 5 ml
3. Tubos de ensayo de 10 X 75 mm
4. Solución salina isotónica
5. Lancetas desechable
6. Aplicadores de madera o palillos
7. Sueros tipificadores anti-A
Anti-B
anti-D (Rh)
8. Placaoscilatoria

DESARROLLO:
Método en tubo

1. Se obtiene aproximadamente 5 ml de sangre venosa y se colocan en un tubo con EDTA. Se centrífuga por 2 min. a 2000 r.p.m. para separar el plasma del paquete celular.
2. Se toman 0.1 ml del paquete celular y se resuspenden en 1.9 ml de solución salina para una suspensión aproximada del 5%.
3. Se marcan tres tubos de la siguiente manera: anti-A, anti-B yanti-D, y se agrega una gota del suero tipificador según corresponda.
4. Se agregan 4 gotas de la suspensión de eritrocitos a cada tubo y se agitan suavemente.
5. Los tubos se centrifugan 1 min a 2000 r.p.m.
6. Se busca la presencia de aglutinación agitando suavemente los tubos. La aglutinación se reconoce por la formación de grumos.
7. Si la prueba en el tubo anti-D es negativa se realiza elsiguiente procedimiento.
8. Se incuba a 37°C por 30 minutos, se centrífuga y se busca la aglutinación.
9. Si persiste la negatividad se lavan los eritrocitos 3 veces con 0.5 ml de solución salina y se elimina perfectamente el sobrenadante.
10. Se agrega una gota del suero de Coombs y se agita suavemente, se centrífuga y se busca la aglutinación

Interpretación:
Si aglutina en el paso 6 es Rhpositivo
Si aglutina en el paso 10 es Du
Si persiste la negatividad es Rh negativo.

Método en portaobjetos

1. Depositar 2 gotas de sangre en tres diferentes divisiones de un portaobjetos.
2. Agregar de izquierda a derecha una gota del antisuero anti-A, una gota de anti-B y una gota de anti-D respectivamente.
3. Mezclar los reactivos con un aplicador de madera diferente para cadagota.
4. Agitar suavemente en la placa oscilatoria.
5. Buscar la presencia de aglutinación.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué contienen los reactivos anti-A y anti-B?
reactivos preparados a partir de anticuerpos monoclonales de clase IgM secreta- dos por líneas celulares de hibridoma de ratón en una solución tamponada conteniendo 1 g/l de azida sódica como conservante.


2. ¿En que se basa la...