Inmunomarcaje

Inmunomarcaje Ki67
Para la identificación de las células reactivas al suero anti-Ki6716, se empleó la técnica inmunohistoquímica de estreptavidina-biotina (Lab. Biogenex, USA), usando como anticuerpo primario el anticuerpo monoclonal PP-67 (anti-Ki67, Lab. Sigma, USA) a dilución 1:200. Las muestras se incubaron en cámara húmeda durante 24 horas a 4o centígrados. El revelado se realizó con unasolucción tamponada conteniendo diaminobencidina (DAB, Lab. Sigma, USA). La reacción de oxidación de la peroxidasa fue interrumpida bajo control microscópico mediante el lavado de las preparaciones con agua corriente. El contraste se efectuó con hematoxilina. Para verificar la especificidad de la reacción, el suero anti-Ki 67 fue sustituido por PBS en lugar del anticuerpo primario con una muestracontrol16, 17.
Inmunomarcaje CD34
Para la identificación del endotelio reactivo al suero anti-CD34 también se empleó la técnica inmunohistoquímica de estreptavidina-biotina (Lab. Biogenex, USA), usando como anticuerpo primario el anticuerpo monoclonal anti-CD34 (clon QBEND/10, Lab. Novocastra , UK) a dilución 1:50. A continuación se procede con las muestras de modo idéntico al expuesto con elanticuerpo anterior. Para verificar la especificidad de la reacción, el suero anti-CD34 fue sustituido por PBS en lugar del anticuerpo primario con una muestra control16, 17.

CD 34: tumores mesenquimales. Células hematopoyeticas y endoteliales.
CD 31: marcador endotelial.

Calretinina
Aplicaciones: La calretinina humana es una proteína ligada a calcio de 29kD de masa molecular que pertenece ala superfamilia de las proteínas "EF-hand".
La calretinina se expresa de forma amplia en el tejido nervioso central y periférico, particularmente en la retina y neuronas sensoriales. Además se ha descrito su presencia en el mesotelio normal y algunas células estromales secretoras del ovario y testículo humano. La positividad de este anticuerpo en mesoteliomas es muy elevada (más del 95 % desensibilidad) y por tanto su máxima utilidad es la identificación de este tipo de neoplasias y su diagnóstico diferencial con otros tumores malignos (más del 90 % de especificidad cuando el objetivo concreto es diferenciar entre mesoteliomas y carcinomas metastásicos dentro de un amplio panel inmunohistoquímico de referencia).
No obstante se ha descrito positividad ocasional de otros tumores paracalretinina como es el caso de meloblastomas, tumores de los cordones sexuales y estroma del ovario y de células de Sertoli-Leydig de testículo.

ANTÍGENO ESPECÍFICO DE LA PRÓSTATA (PSA)
Es una proteasa de la familia de las kalicreínas, cuya función fisiológica parece que se relaciona con la fertilidad, lisando el coágulo de semen. Inicialmente se pensó que esta glicoproteína se secretabaexclusivamente por la glándula prostática, sin embargo se ha demostrado que también puede producirse en las glándulas mamarias o salivares, aunque en cantidades muy pequeñas. Los niveles detectables de PSA en el suero se considera que sólo se originan en las células del epitelio columnar de la próstata. La extensa utilización de este MT en el cáncer prostático, tiene una gran relación con esa casi totalespecificidad de órgano.
Se le ha considerado el MT más valioso descubierto13,14. Ese importante valor de PSA se ha traducido en modificaciones sustanciales en cuanto a: la prevalencia de cáncer de próstata, la mediana de edad en la que el cáncer se diagnostica, la estratificación de los estadios clínicos, la selección de los pacientes para el tratamiento y la monitorización del seguimiento.
PSAasociado al tacto rectal, constituye el binomio diagnóstico de primera línea aceptado para efectuar el screening y detección precoz del cáncer de próstata. Varios estudios de screening reuniendo en total o más de 19.800 varones, han demostrado el incuestionable valor del PSA para detectar cáncer de próstata en un estadio precoz, potencialmente curable. The American Cancer Society National Prostate...