La Celula

Propósito
Identificar los aminoácidos de una muestra biológica por medio de cromatografía en papel para su cuantificación química.

Fundamento
La cromatografía (del griego chroma, color + graphein) fue descrita en 1903 por el británico ruso Mikhail Tswett, quien separo pigmentos de hojas de plantas medicinales mediante el huso de adsorbentes sólidos, es decir, un sólido a cuya superficie seunen las sustancias. La cromatografía incluye una serie de métodos analíticos de separación que tiene como característica general el estar constituidos de una fase estacionaria y una fase móvil, entre las que se distribuyen diferencialmente las sustancias a separar. Cuando la fase móvil, la que arrastra a las partículas que se va a separar, es un líquido (solvente o mezcla de solventes) sedenomina cromatografía de líquidos. Si la fase móvil es un gas se denomina cromatografía de gases.
En cuanto a la fase estacionaria, esta puede ser de composición variada. Si dicha fase utiliza un papel filtro, se denomina cromatografía en papel.
La cromatografía en papel, desarrollada en 1941 por Archer Martin y Richard Synge, es una técnica en la que se aplica un pequeño volumen de la muestra cercade uno de los extremos de una hoja de papel filtro. Este tipo de cromatografía es ascendente, cuando el papel se sujeta a la parte superior de la cámara y se sumerge en el solvente que se encuentra en el fondo, haciendo que este se mueva hacia arriba por capilaridad. Al realizarse la separación, los solutos de la mezcla original migran a lo largo del papel con diferentes velocidades, dependiendode su solubilidad en el solvente, separándose. Si los compuestos son coloridos se puede ver fácilmente las manchas que deja sobre el papel, el caso contrario, hay que teñirlos con algún reactivo.
La relación de migración de una sustancia (Rf), puede expresarse de acuerdo con la siguiente formula:
Rf = Distancia recorrida por la muestra
Distancia recorrida por la mezclaeluyente

Cada sustancia exhibe un valor Rf característico en relación con un sistema disolvente dado y con el empleo de un tipo determinado de soporte.
La cromatografía en papel puede aplicarse como técnica para la separación de aminoácidos y péptidos.
Los aminoácidos proteicos son los ácidos carboxílicos portadores de funciones amina en el carbono α, como se muestra en la siguiente figura:COOH COO- COO-
H3N+ C H H3N+ C H H2N C H

R pK1 R pK2 R

Existen veinte diferentes tipos de aminoácidos que forman a las proteínas (poli péptidos). De acuerdo con su grupo R, los aminoácidos se pueden clasificar en: nopolares, polares sin carga, polares con carga negativa y polar con carga positiva.
El aspartame (L-aspartil-Lfenilalanina metiléster) es un edulcorante que se elabora industrialmente y tiene el sabor dulce y puro del azúcar de mesa (sacarosa), pero solo añade cantidades mínimas de calorías. Se utiliza en una gran variedad de alimentos dietéticos, como refrescos, yogurt, goma de mascar y endulzantes demesa.
Este dipéptido formado por los aminoácidos fenilalanina y acido aspártico, tiene, entre otros nombres comerciales, los de Nutrasweet y Canderel. En la actualidad el uso del aspartame se ha generalizado en la elaboración de productos dietéticos, ante el amplio número de investigaciones que el aspartame es seguro para el consumo humano. Sin embargo, algunas investigaciones cuestionan el uso deeste producto, ya que durante su metabolismo en el organismo, el aspartame se descompone en los aminoácidos fenilalanina y el ácido aspártico y en alcohol metílico.
Los aminoácidos y los péptidos, entre ellos los dipeptidos como el aspartame, pueden ser separados, dependiendo de su solubilidad, en solventes polares o no polares utilizando técnicas analíticas de separación como la cromatografía...