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PRÁCTICA No. 4: “MÉTODO ACUSO PARA LA CUANTIFICACIÓN DE CLORHIDRATO DE AMBROXOL TABLETAS”.
OBJETIVO.
Realizar una curva de calibración de clorhidrato de amboxol en medio acuoso.
GENERALIDADES.
La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas ya su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por la misma.
Una curva de valoración fotométrica es una gráfica de absorbancia en función del volumen del valorante. Con elfin de obtener curvas de valoración con porciones lineales que puedan explotarse, el sistema o los sistemas absorbentes deben cumplir la Ley de Beer. El clohidrato de ambroxol es un expectorante mucolítico y usado para reducir la viscosidad de las secreciones mucosas.
Para establecer un método acuoso para la determinación de Clorhidrato de Ambroxol, se debe tener a consideración la obtenciónde soluciones acuosas con valores de pH estables. Esto puede lograrse con la ayuda de un buffer de fosfato con un pH 6.8, el cual reducirá la hidrólisis del principio activo, evitando obtener así metabolitos no deseados que puedan influir en la determinación de la ecuación de la recta al influir en las concentraciones de ambroxol presente en las soluciones.
FUNDAMENTO.
La ley de Lambert-Beerexpresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de longitud de onda fija) y concentración de un cromóforo en solución:
A=logP0P=εbc
c=concentración de la especie absorbente
b=camino óptico
ε=coeficiente de extinsión
La absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración (a mayor número de moléculas mayor interacción de la luz con ellas); también depende de ladistancia que recorre la luz por la solución (a igual concentración, cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra más moléculas se encontrará); y por último, depende de ε, una constante de proporcionalidad (denominada coeficiente de extinción) que es específica de cada cromóforo.
Material:
* 1 matraz volumétrico de 1L.
* 1 matraz volumétrico de 250ml.
* 9 matraces volumétricosde 25ml.
* 1 pipeta volumétrica de 1ml.
* 1 pipeta volumétrica de 2ml
* 1 pipeta volumétrica de 3ml
* 1 pipeta volumétrica de 4ml
* 1 pipeta volumétrica de 5ml
* 1 pipeta volumétrica de 10ml
* 2 vasos de precipitado de 50ml.
* Celdas de cuarzo de 1cm.

Reactivos:
* Agua destilada.
* Clorhidrato de ambroxol 25mg
* Solución amortiguadora de fosfatos pH6.8
TÉCNICA:
1. Preparar la solución estándar de clorhidrato de ambroxol de 100 µg/mL de la siguiente manera:
a) Pesar con exactitud 25mg de clorhidrato de ambroxol y colocarlo en un matraz volumétrico de 250ml.
b) Disolver con el mínimo de buffer de fosfatos (5mL) en el sonificador
c) Añadir poco a poco y con agitación constante agua destilada hasta llegar al volumen.
2.Preparar una curva patrón de clorhidrato de ambroxol en medio de disolución con las siguientes concentraciones: 4, 8, 12, 16, 20, 40, 60, 80 y 100 µg/mL utilizando 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20 y 25 ml respectivamente, de la solución estándar de clorhidrato de ambroxol de 100 µg/mL, aforando a 25 mL con agua.
3. Leer la absorbancia a 308 nm utilizando como blanco mezcla de agua con buffer defosfatos (0.5mL y aforar a 25 mL con agua destilada)
4. Graficar la Concentración (X) contra la Absorbancia (Y) obtenida.
Resultados:
Barrido de la Sustancia de Referencia a una longitud de onda =308 nm
235 | 1.5505 |
240 | 1.8583 |
245 | 1.7618 |
250 | 1.6520 |
255 | 1.2041 |
260 | 0.7089 |
265 | 0.3943 |
270 | 0.2557 |
275 | 0.2082 |
280 | 0.2053 |
285 | 0.2425 |
290 |...