meselson_stahl

Experimento de Meselson y Stahl sobre la síntesis de DNA en procariotas
Meselson y Stahl (1958) demostraron que el DNA de E. coli se replica de forma semiconservativa, tal como habían propuestoWatson y Crick (1953) al elaborar el modelo molecular del DNA y tal como podía deducirse de los experimentos realizados previamente por Taylor (1957) sobre la síntesis de DNA en eucariotas. Elexperimento de Meselson y Stahl está basado en la variación de la densidad de flotación del DNA derivada
de la utilización del isótopo pesado del nitrógeno (N15) y el análisis de dicha variación mediante latécnica de ultracentrifugación en gradiente de Cloruro de Cesio. Cultivo de E. coli Incubación durante varias generaciones en un
medio que contiene precursores del DNA con N15

El DNA de lascélulas de este cultivo contiene el isótopo pesado del nitrógeno, N15

Absorbancia
(260 nm)

DNA N14

Aislamiento de DNA y
ultracentrifugación en
gradiente de densidad
de ClCs

nº de lafracción del tubo
de la ultracentrífuga

+

densidad de flotación

Absorbancia
(260 nm)

-

DNA N15

nº de la fracción del tubo
de la ultracentrífuga

Experimento

Resultados

Cultivobacteriano con
DNA N15

DNA N15

Aislamiento de DNA
(fragmentado)
y
ultracentrifugaci ón
en gradiente de
densidad de ClCs
nº de la fracción del tubo
de la ultracentrífuga

Absorbancia(260 nm)

Primera
generación
(G1)

Transcurrido el tiempo
correspondiente a una
generación (G1), se aisla el
DNA (fragmentado) y se
ultracentrifuga en gradiente
de densidad de ClCs

El DNAen la generación G1 tiene
una densidad intermedia entre la
del DNA N15 y la del DNA N14

nº de la fracción del tubo
de la ultracentrífuga

En la generación G2 la mitad del
DNA tiene unadensidad intermedia
entre la del DNA N15 y la del DNA
N14, la otra mitad tiene una
densidad igual a la del DNA N14,
Absorbancia
(260 nm)

Segunda
generación
(G2)

Transcurrido el tiempo...