microbiologia 5 universidad nacional de ingenieria

I. OBJETIVO



 Conocer la importancia de la acción inhibidora de los agentes bacteriostáticos.
 Comprobar que la acción bacteriostática depende de la concentración.
 Demostrar la acción oligodinámica de los metales pesados, en este caso el cobre.

II. FUNDAMENTO TEORICO


Acción bacteriostática selectiva:
La acción bacteriostática es un conjunto de procesos en el cual altera lareproducción de ciertas bacterias. Lo que conlleva a que se vuelva lento el proceso de la multiplicación de los gérmenes patógenos, con lo que se tornan más vulnerables ante los procesos defensivos humorales y celulares del organismo. La actividad bacteriostática se explora mediante el método de difusión sobre

Agente bacteriostático:
Es aquél que tiene la propiedad de inhibir la multiplicaciónbacteriana, inhiben la tinción de las bacterias, la misma que se reanuda cuando se retira el agente. Algunos agentes tienen finalidad particular por medio de genes o los lesionan específicamente.

Cristal violeta:
El cristal violeta es un colorante derivado del trifenilmetano, como sabemos el fenol y sus derivados actúan como microbicidas o microbiostáticos dependiendo de la concentración quese utilice. Los fenoles poseen efecto germicida pues dañan la membrana y desnaturalizan las proteínas bacteriales.
Los colorantes básicos como el violeta de cristal, reaccionan intensamente con los ácidos nucleídos de las nucleoproteínas, quizás por la formación de sales. Las bacterias Gram + son más sensibles que las Gram –, que se debe al carácter ácido de las proteínas de las células, granpositivas.
Bacteria Gram Positiva Bacteria Gram Negativa

Tiene una capa gruesa de peptidoglicano y dos clases de ácidos teicoicos.. El ácido Teicoico es el responsable del determinante antigénico del organismo. Entre la membrana citoplásmica y la pared celular hay un espacio periplásmico con enzimas hidrolíticas, enzimas inactivadoras de antibióticos y proteínas de transporte.Utilidad de la acción bacteriostática:
Las razones principales para controlar los microorganismos son: prevenir la transmisión de enfermedades, evitar el deterioro de los alimentos y evitar la contaminación tanto en procesos industriales que requieran cultivos puros, como en laboratorios de diagnóstico o investigación. Además se ha difundido mucho el uso de agentes bacteriostáticos en la industriafarmacéutica para la producción de antibiótico.



Acción oligodinámica de los metales pesados
La acción oligodinámica es la propiedad que tiene ciertos metales pesados en cantidades sumamente pequeñas, en particular la plata, para ejercer efectos letales sobre las bacterias. Este fenómeno se demuestra fácilmente en laboratorio poniendo un pedazo de metal limpio (en nuestro caso una moneda de 10céntimos) de plata o cobre sobre una placa de cultivo. Después de la incubación se verá una zona de inhibición de crecimiento microbiano rodeando al metal. La cantidad de material involucrada en el efecto de inhibición de los microorganismos se puede expresar en partes por millo (ppm). La eficacia de estas pequeñas cantidades de metal es por la gran afinidad que tienen las proteínas celulares porlos iones metálicos. Se acumulan grandes cantidades de estos iones en las células a partir de soluciones diluidas.

III. INSTRUMENTOS Y EQUIPOS UTILIZADOS
Instrumentos:
¥ Muestra microbiana(Escherichia y Subtillis)
¥ Tubos de ensayo
¥ Placa Petri

Sustancias:
¥ Aceite De inmersión
¥ Moneda de 10 céntimos (tiene en su composición cobre)
¥ Cristal Violeta
¥ Lugol


Equipos:
¥Incubadora
¥ Microscopio
¥ Equipo de preparación de medios de cultivo
¥ Autoclave
¥ Horno



IV. PROCEDIMIENTO

• PROCEDIMIENTO A: Acción bacteriostática del cristal violeta.

- Obtener a partir del cristal violeta 1:1000, las siguientes diluciones:1:10000, 1:100000,1:1000000. Luego verter 1 ml de cada dilución en una placa petri cada una.


- Verter en cada placa agar fundido y rotar...