Microtomia.
Páginas: 9 (2050 palabras)
Publicado: 23 de septiembre de 2013
MICROTOMIA O CORTE DE LOS TEJIDOS
¿Qué es la microtomía?
Es el proceso que tiene como finalidad la obtención de cortes muy delgados del tejido o espécimen que se encuentra incluido en la parafina. Esta se realiza por medio de un instrumento llamado micrótomo
Existen diversos tipos de micrótomo, siendo algunos adaptados para un trabajo especial. Generalmente se consideran cinco clasesde micrótomo: Rotación, Deslizamiento, Balanceo, Congelación y para cortes ultra delgados.
Micrótomo de Rotación.
Es el micrótomo mas empleado. La cuchilla es relativamente pequeña permaneciendo en una posición muy peligrosa (con el filo hacia arriba). No conviene para cortar bloques grandes.
Micrótomo de Deslizamiento.
Es el instrumento de mayor preferencia. Tiene un sujetador decuchilla ajustable tanto para el ángulo de deslizamiento horizontal como angular. Permite obtener grandes cortes y se puede emplear cuchillas mayores que los que usan los de rotación.
Micrótomo de Balanceo.
Probablemente es el micrótomo más simple que existe. El bloque del tejido se monta en el extremo de un brazo móvil y la cuchilla se mantiene rígida en posición horizontal con el filo haciaarriba.
Micrótomo por Congelación.
Se define de muchos maneras, pero en general, poseen una cremallera central sobre la cual se coloca el congelador del bloque el cual es perforado y unido por un tubo a un cilindro que contiene Bióxido de Carbono.
Cuchillas para Micrótomo.
1) Cuchillas convencionales: Las cuchillas convencionales son grandes y pesadas. Su tamaño varia entre 110mm y250mm. Sus perfiles están designados para aplicaciones específicas.
2) Cuchillas desechables: Proveen excelente filo para cortar parafina. Estas son de diferente tamaño y grosor.
Porta cuchillas o Jolder: Es de acero inoxidable para cuchillas desechables.
PASOS A SEGUIR PARA OBTENER CORTES EN PARAFINA:
1- Antes de cortar un bloque hay que examinarlo y saber cómo va a ser orientado enel porta bloque.
2- Remover el exceso de parafina de los lados.
3- Colocar el bloque en el porta bloque.
4- Ajuste preciso con los tornillos del porta bloque.
5- Orientar y ajustar con los tornillos de direccionamiento (laterales y verticales) hasta que el bloque quede completamente paralelo al porta cuchilla.
6- Colocar la cuchilla.
7- Proceder a tomar rebanadas gruesas hasta visualizarpor completo el tejido ( 5, 10, 15 micras).
8- Una vez que la superficie tisular entera este expuesta reajustar las micras (el numero de estas es de acuerdo al tipo de tejido que estemos trabajando).
9- Tomar el corte con agujas histológicas y colocarlas en el baño de flotación o bien sea en plancha de calentamiento hasta que los cortes queden completamente estirados y sin burbujas.
10-Recoger con el porta objeto el corte y colocarlo en gradillas a la estufa de 37°
El paso de la plancha de calentamiento se realiza de la siguiente manera:
a) Tomar el porta objeto e impregnarlo con agua gelatinosa.
b) Colocar el corte sobre el porta objeto.
c) Colocarlo en la plancha de calentamiento que debe estar por debajo del punto de fusión de la parafina (30° a 35°).
d) Una vez estiradoslos cortes (tiempo aproximados de 5 a 10 seg.) colocarlos en una gradilla para el secado (en estufa de 37°).
NOTA: estas láminas en la estufa pueden permanecer hasta más de 24hrs.
Una vez pegados los cortes pueden, o bien almacenarse indefinidamente, o bien pasar a la desparafinación y posterior hidratación y teñido de los mismos; para ello se utiliza el proceso inverso al realizado para lainclusión con la variante de utilizar el xileno o el benceno para eliminar la parafina. En este punto del proceso, la utilización de xileno o benceno en los cortes no es tan importante como cuando se incluye en parafina, ya que el corte se encuentra pegado sobre el porta. El proceso a seguir será el siguiente.
Desparafinado e hidratado
1.- Xileno------------------------1/2 hora
2.-...
¿Qué es la microtomía?
Es el proceso que tiene como finalidad la obtención de cortes muy delgados del tejido o espécimen que se encuentra incluido en la parafina. Esta se realiza por medio de un instrumento llamado micrótomo
Existen diversos tipos de micrótomo, siendo algunos adaptados para un trabajo especial. Generalmente se consideran cinco clasesde micrótomo: Rotación, Deslizamiento, Balanceo, Congelación y para cortes ultra delgados.
Micrótomo de Rotación.
Es el micrótomo mas empleado. La cuchilla es relativamente pequeña permaneciendo en una posición muy peligrosa (con el filo hacia arriba). No conviene para cortar bloques grandes.
Micrótomo de Deslizamiento.
Es el instrumento de mayor preferencia. Tiene un sujetador decuchilla ajustable tanto para el ángulo de deslizamiento horizontal como angular. Permite obtener grandes cortes y se puede emplear cuchillas mayores que los que usan los de rotación.
Micrótomo de Balanceo.
Probablemente es el micrótomo más simple que existe. El bloque del tejido se monta en el extremo de un brazo móvil y la cuchilla se mantiene rígida en posición horizontal con el filo haciaarriba.
Micrótomo por Congelación.
Se define de muchos maneras, pero en general, poseen una cremallera central sobre la cual se coloca el congelador del bloque el cual es perforado y unido por un tubo a un cilindro que contiene Bióxido de Carbono.
Cuchillas para Micrótomo.
1) Cuchillas convencionales: Las cuchillas convencionales son grandes y pesadas. Su tamaño varia entre 110mm y250mm. Sus perfiles están designados para aplicaciones específicas.
2) Cuchillas desechables: Proveen excelente filo para cortar parafina. Estas son de diferente tamaño y grosor.
Porta cuchillas o Jolder: Es de acero inoxidable para cuchillas desechables.
PASOS A SEGUIR PARA OBTENER CORTES EN PARAFINA:
1- Antes de cortar un bloque hay que examinarlo y saber cómo va a ser orientado enel porta bloque.
2- Remover el exceso de parafina de los lados.
3- Colocar el bloque en el porta bloque.
4- Ajuste preciso con los tornillos del porta bloque.
5- Orientar y ajustar con los tornillos de direccionamiento (laterales y verticales) hasta que el bloque quede completamente paralelo al porta cuchilla.
6- Colocar la cuchilla.
7- Proceder a tomar rebanadas gruesas hasta visualizarpor completo el tejido ( 5, 10, 15 micras).
8- Una vez que la superficie tisular entera este expuesta reajustar las micras (el numero de estas es de acuerdo al tipo de tejido que estemos trabajando).
9- Tomar el corte con agujas histológicas y colocarlas en el baño de flotación o bien sea en plancha de calentamiento hasta que los cortes queden completamente estirados y sin burbujas.
10-Recoger con el porta objeto el corte y colocarlo en gradillas a la estufa de 37°
El paso de la plancha de calentamiento se realiza de la siguiente manera:
a) Tomar el porta objeto e impregnarlo con agua gelatinosa.
b) Colocar el corte sobre el porta objeto.
c) Colocarlo en la plancha de calentamiento que debe estar por debajo del punto de fusión de la parafina (30° a 35°).
d) Una vez estiradoslos cortes (tiempo aproximados de 5 a 10 seg.) colocarlos en una gradilla para el secado (en estufa de 37°).
NOTA: estas láminas en la estufa pueden permanecer hasta más de 24hrs.
Una vez pegados los cortes pueden, o bien almacenarse indefinidamente, o bien pasar a la desparafinación y posterior hidratación y teñido de los mismos; para ello se utiliza el proceso inverso al realizado para lainclusión con la variante de utilizar el xileno o el benceno para eliminar la parafina. En este punto del proceso, la utilización de xileno o benceno en los cortes no es tan importante como cuando se incluye en parafina, ya que el corte se encuentra pegado sobre el porta. El proceso a seguir será el siguiente.
Desparafinado e hidratado
1.- Xileno------------------------1/2 hora
2.-...
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