Obtencion De Espermatosoides De Epididimo

Obtención de espermatozoides de epidídimo (cabeza, cuerpo y cola) de toro.

Introducción. Los espermatozoides de una gran variedad de especies, cobayo, rata, conejo, hámster, carnero, toro, cerdosufre el proceso de maduración durante su paso a través del epidídimo dando como resultado el desarrollo de su capacidad fertilizante al momento de alcanzar la parte más distal del órgano. Elepidídimo contribuye activamente a la maduración del espermatozoide con factores producidos por el epitelio bajo la influencia de andrógenos. Cuando se ha analizado la movilidad de los espermatozoides dediferentes segmentos del epidídimo se ha encontrado un incremento en la movilidad progresiva a medida que los espermatozoides pasan por el epidídimo, además, de un incremento en la formación de puentesdisulfuro.

Objetivo. Aprender a obtener espermatozoides de las diferentes regiones del epidídimo de toro y observar su tipo de movilidad.
Material:
1 Jeringa de insulina
1 Jeringa de 10 ml.Portaobjetos
Cubreobjetos
3 vasos de precipitado de 100 ml.
Tubos de ensaye
Gradilla para tubos
2 embudos
Micropipeta de 100 ul.
Gasas
Guantes

Material Biológico:
Epidídimos de toros adultosrecién sacrificados.

Equipo:
Estuche de disección
Microscopio óptico
Baño María

Soluciones:
Medio de Tyrode (TALP) - (NaCl 114 mM, KCl 3.2 mM, CaCl2 2.0 mM, MgCl2 0.5 mM, NaCO3 25.0 mM,NaH2PO4.H2O 0.4 mM, Glucosa 5.0 mM, Lactato de sodio 10.0 mM, Piruvato de sodio 0.1 mM, Penicilina 100,000 Unidades/L, Estreptomicina 100,000 Unidades/L, Rojo de Fenol 10 mg/L, Albúmina de suero bovino 3mg/mL). Ajustar el pH a 7.4.
NaCl 0.9%

Metodología:
Los epidídimos de toro se obtienen del rastro de animales adultos recién sacrificados.
Se trasladan al laboratorio en solución salina al 0.9%a 37 °C.
Se limpian de grasa y sangre (perfundir con solución salina por las diferentes venas con jeringa de insulina).

Espermatozoides de la cola del epidídimo.
Los espermatozoides de la cola...