okazaki

FRAGMENTO DE OKAZAKI
Durante la replicación de ADN, se conocen como fragmentos de Okazaki a las cadenas cortas de ADN recién sintetizadas en la hebra discontinua. Éstos se sintetizan en dirección 5’→ 3’ a partir de cebadores de ARN que después son eliminados. Los fragmentos de Okazaki se unen entre sí mediante la ADN ligasa completando la nueva cadena.
Están formados por 1000 a 2000nucleótidos en Escherichia coli y entre 100 y 200 nucleótidos en eucariotas. Están separados por cebadores de ARN de aproximadamente 10 nucleótidos de longitud.
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PROCESO
En el momento de la replicación de ADN, la doble hélice se abre (por actuación del enzima helicasa, que rompe los puentes de hidrógeno entre las dos hebras de ADN), formando la horquilla de replicación. A medida que la helicasa abrela cadena, se replican sus dos hebras. Cada hebra nueva de ADN empieza a partir de un cebador de ARN sintetizado por la primasa, mediante la ADN polimerasa III.
La enzima ADN polimerasa añade los nuevos nucleótidos en dirección 5' 3' pero ambas cadenas son antiparalelas. En una de las cadenas la enzima actúa a medida que se abre la horquilla (cadena continua), sin embargo en la otra cadena(cadena discontinua) la adición de los nuevos nucleótidos no puede llevarse a cabo de forma continua ya que tiene el sentido 3' 5'. A medida que la helicasa abre la doble hélice original, debe agregarse un cebador en el extremo 3' de la cadena discontinua, luego sintetizar ADN hasta el ARN cebador anterior. Esta función la ejerce la primasa. Estos fragmentos de ARN, son luego reemplazados porsecuencias de ADN mediante la acción de la ADNpolimerasa III .
Los cebadores son retirados o degradados por la ADN polimerasa I, siendo sustituidos por los desoxirribonucleótidos trifosfato (dNTP) correspondientes en lo que se conoce como desplazamiento de la mella.
Una vez han sido retirados los cebadores de ARN, la ADN ligasa une los extremos de los fragmentos de Okazaki y da lugar a una cadenacontinua de ADN.

EXPERIMENTOS
En el momento de la replicación de ADN, la doble hélice se abre (por actuación del enzima helicasa, que rompe los puentes de hidrógeno entre las dos hebras de ADN), formando la horquilla de replicación. A medida que la helicasa abre la cadena, se replican sus dos hebras. Cada hebra nueva de ADN empieza a partir de un cebador de ARN sintetizado por la primasa, mediantela ADN polimerasa III.
La enzima ADN polimerasa añade los nuevos nucleótidos en dirección 5' 3' pero ambas cadenas son antiparalelas. En una de las cadenas la enzima actúa a medida que se abre la horquilla (cadena continua), sin embargo en la otra cadena (cadena discontinua) la adición de los nuevos nucleótidos no puede llevarse a cabo de forma continua ya que tiene el sentido 3' 5'. A medidaque la helicasa abre la doble hélice original, debe agregarse un cebador en el extremo 3' de la cadena discontinua, luego sintetizar ADN hasta el ARN cebador anterior. Esta función la ejerce la primasa. Estos fragmentos de ARN, son luego reemplazados por secuencias de ADN mediante la acción de la ADNpolimerasa III .
Los cebadores son retirados o degradados por la ADN polimerasa I, siendosustituidos por los desoxirribonucleótidos trifosfato (dNTP) correspondientes en lo que se conoce como desplazamiento de la mella.
Una vez han sido retirados los cebadores de ARN, la ADN ligasa une los extremos de los fragmentos de Okazaki y da lugar a una cadena continua de ADN.
EXPERIMENTEl trabajo de Kiwako Sakabe y el matrimonio Okazaki aportó evidencias experimentales a la hipótesis que suponía lareplicación de ADN como un proceso discontinuo. Anteriormente, era comunmnente aceptado que la replicación era continua en ambas cadenas (3’ 5’ y 5’ 3’). Para indicar la orientación de una cadena de ADN o ARN, se utilizan los números 3’ y 5’, los cuales hacen referencia a la posición de los átomos de carbono dentro de la molécula de desoxirribosa en los ácidos nucléicos.
En 1967, el equipo de...