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251 años después, el 21 de julio de 1775, por Real Cédula sería aprobada el tercer traslado de la ciudad de Santiago, esta vez al Valle de la Virgen.
El 25 de julio de 1524, don Pedro de Alvaradofundó en Iximché, la Ciudad de Santiago, primera ciudad y capital del Reino; y aunque sólo tardó un mes el asentamiento de la capital en la sede del reino de los cackchiqueles, porque el conquistadordecidió quemarla ante los rumores de una posible emboscada ººcontra sus tropas, es considerada como la primera capital del Reino de Guatemala, pues en ella se estableció el primer ayuntamiento.
Luegode la rebelión cackchiquel y del incendió de Iximché, Alvarado permaneció activo con sus tropas haciendo la guerra a los pueblos que opusieron resistencia, viviendo en barracones, hasta que decidióconstruir la ciudad en el Valle de Almolonga, situado en las faldas del Volcán de Agua, hecho que cumplió el 22 de noviembre de 1527.
La segunda ciudad, se estableció donde actualmente se encuentra lapoblación de Ciudad Vieja, al pie del Volcán Hunapú, hoy conocido como Volcán de Agua, donde creció y se embelleció con calles bien trazadas, una hermosa catedral y un Palacio de Gobierno, amén decasas señoriales para los principales lugartenientes de Alvarado.
Una vez establecidos, Alvarado emprendió un nuevo viaje de conquista, esta vez hacia el norte, llegó a México, y en el pueblo deNochistlán, encontró muerte trágica en Guadalajara, el 4 de julio de 1541, dejando a su esposa doña Beatriz como heredera, al Obispo Marroquín y a don Juan de Alvarado como albaceas en la Ciudad de Santiago.La nueva ciudad tuvo un final trágico 14 años después, cuando fue destruida por una riada que bajó del volcán entre el 10 y 11 de septiembre de 1541, muriendo en el desastre la Gobernadora doñaBeatriz de la Cueva, viuda del adelantado Pedro de Alvarado.
El primer Obispo de Guatemala Francisco Marroquín, y Francisco de la Cueva, hermano de doña Beatriz, gobernadores interinos de la ciudad,...