Pitochu

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  • Publicado: 21 de noviembre de 2010
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 Físicos:  Congelación: Se utiliza como método para la fijación el enfriamiento por congelación del tejido es el método de elección para realizar estudios morfológicos o funcionales en los que se requiere conservar intacta la estructura antígena del tejido o su contenido enzimático. La clave para una correcta fijación por congelación del tejido es que su realización sea instantánea porque unenfriamiento lento provoca la formación de microcristales titulares de hielo que pueden agregarse con el paso del tiempo produciendo roturas titulares que dificulten el diagnosticoEl procedimiento idóneo para fijar tejidos por congelación consiste en utilizar ISOPENTANO a menos de 50ºC como agente de congelación y realizar una fragmentación suficiente de la muestra que se vaya a congelar.Normalmente se preparan bloques de no más de 3 cm. cuadrados de superficie y 3 mm de espesor de modo que el proceso de congelación instantánea no requiera más de 10 segundos. El mantenimiento continuo de isopentano debe realizarse en un congelador programado a 70ºC para que quede compensado la subida inmediata de la temperatura que se produce al extraer el liquido del congelador. Al enfriar tanto no actúanbacterias ni enzimas y el tejido se endurece para cortar estos tejidos utilizamos el microtomo de congelación o un aparato mas evolucionado o criostato el cual tiene como ventajas que la temperatura se mantiene mas baja y se pueden realizar cortes mas finos entre 2 y 15 micras.  Criodesecación o filiación: Consiste en someter al tejido a dos procesos el primero es la fijación instantánea porcongelación en Nitrógeno liquido y el segundo desecación por sublimación directa del agua confiada a vapor en una bomba de vacío es un proceso complicado y costoso pero tiene una ventaja muy importante y es que al eliminar totalmente el agua tisular, paraliza la autolisis y produce una conservación indefinida, además evita que se produzcan enlaces químicos entre el tejido y el fijador, conservandoasila estructura antigénica tisular.  Criosustitución: es la sustitución lenta y progresiva del agua congelada de un tejido por un líquido fijador que en ocasiones puede actuar simultáneamente como medio de inclusión. Tras la congelación instantánea del tejido con nitrógeno liquido o isopentano a -50ºC se coloca el tejido congelado en el medio de sustitución, este medio está formado por una mezclade alcohol etílico, acetona y propilén- glicol. Enfriado a -40ºC, el intercambio del agua tisular por el líquido de sustitución, se realiza dentro de un congelador y debe procurarse que la temperatura no disminuya del punto de congelación del líquido de sustitución.  Químicos:  Características fundamentales de un líquido fijador: Los fijadores por métodos químicos son normalmente químicos y debenposeer unas características que son las siguientes:  Deben tener la capacidad de bloquear de inmediato la autolisis, paralizando la actividad enzimática del tejido.  Poseer un efecto microbicida, que impide la acción bacteriana responsable de la putrefacción.  Son capaz de no provocar sobre el tejido retracciones o distorsiones que generen anomalías en su estructura.

 Sea capaz de inducircambios en la textura y composición tisular que favorezcan la inclusión, el corte y la coloración del material histológico (favorecer la coloración posterior es decir tienen carácter mordiente) De todas estas características la más importante es la capacidad de bloquear la autolisis de inmediato y se va a relacionar con dos cualidades del agente fijador:  Velocidad de penetración: y se refiere ala rapidez con lo que un fijador se difunde en el interior de un tejido de manera que el tamaño de una pieza que se pretende fijar ha de ser proporcional a la velocidad de penetración del agente fijador que se va a utilizar.  La velocidad de fijación: se refiere al tiempo que cada fijador tarda en estabilizar los componentes químicos de los tejidos. La velocidad de fijación de un agente...
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