Plasmido

Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
“Aislamiento del DNA plasmídico”
Hernández Pineda David, Brito Pérez Yesenia
Grupo: 2OM1 Sección 1


IntroducciónUn elemento central en la tecnología del DNA recombinante es el aislamiento y propagación dentro de un organismo (bacteria) de moléculas idénticas de DNA. Éstas moléculas de DNA se copian(amplificación) utilizando la maquinaria de replicación de la célula huésped. Llamamos plásmido o vector a una sola molécula de DNA circular que porta la información necesaria para replicarse de forma autónomaen la célula huésped.

Éstos plásmidos contienen genes que confieren resistencia a antibióticos, de formas que podemos seleccionar, por resistencia al antibiótico, aquellas bacterias que locontienen frente a las que no.

Otra característica importante es que los plásmidos contienen secuencias específicas que permiten introducir en dichos sitios, fragmentos de DNA de cualquier procedencia.Este fragmento de DNA introducido en el vector será replicado la célula huésped al igual que el resto del DNA de dicho vector.

Este proceso de poder replicar dentro de un huésped un fragmento de DNAde otra procedencia es lo que llamamos clonaje.

Objetivos
* Aislar DNA de plásmido bacteriano.

* Por medio de electroforesis en gel de agarosa comprobar el asilamiento del DNA.Resultados

Figura 1 Figura 2 Figura 3

Discusión
Al agregar la solución I (Glucosa-Tris-EDTA-RNasa A) el TRIS aporta una capacidad taponante que mantiene un pH, el EDTA actuacomo un agente quelante que captura los iones divalentes para que el DNA no sea degradado. Al recoger el Mg que existe en la solución baja la actividad enzimática de RNasas.
La solución II contiene (SDS1 %- NaOH 0.2 N), donde el SDS actuará como detergente que ayuda a abrir los poros de la pared celular de la bacteria que con ayuda del NaOH debilita la pared y la lisa ya que se encuentra en un pH...