REACCIONES DE HEMAGLUTINACIÓN Y LISIS.

REACCIONES DE HEMAGLUTINACIÓN Y LISIS.
2.1. AGLUTINACIÓN.
Son técnicas más sensibles que las anteriores que se usan para valorar la presencia de Ac específicos en el suero. Se basan en la capacidad de los Ag particulados, unidos a sus Ac complementarios, para aglutinarse dando lugar a un agregado que se ve a simple vista.

Esta técnica puede ser:
- Cualitativa: resultado positivo onegativo.
- Cuantitativo: sí se hace una dilución seriada del suero y se calcula el título de Ac. Título de Ac es la inversa de la máxima dilución del suero que da positiva la reacción de aglutinación.
Dependiendo de la conformación del Ag, se pueden distinguir dos tipos básicos de aglutinación:
2.1.1. AGLUTINACIÓN DIRECTA.
Se utilizan Ag formes o particulados en suspensión (bacterias protozoos oesporas). Todos ellos exhiben determinantes antigénicos o epitopos en su periferia.

Cuando esta suspensión antigénica se enfrenta a un suero problema:
- REACCIÓN POSITIVA: Los Ac frente a esos epitopos producirán la correspondiente aglutinación y formación de IC, evidenciándose mediante la aparición de un velo malla característico en el medio.
- REACCIÓN NEGATIVA: sí no hay Ac, no se formaranlos IC y en consecuencia los Ag particulados sedimentan formándose un anillo o botón bien definido en el fondo del tubo o pocillo de reacción.
2.1.2. AGLUTINACIÓN INDIRECTA.
Para esta técnica se utilizan Ag particulado soluble sensibilizado (epitopos sobre un soporte sólido inerte en solución). Se usan bolas de látex, carbón activo, bentonita, etc.

2.1.2.1. AGLUTINACIÓN INDIRECTA EN PORTA.
Sesuele efectuar sobre un porta y no en tubo o placa, mezclándose una gota de látex sensibilizado y una gota de suero, verificándose la reacción en un tiempo muy corto (2-10 minutos).
La reacción positiva se evidencia por la aparición de un moteado característico, ausente en la negativa. Normalmente la técnica es cualitativa, con resultado +/-; pero puede convertirse en cuantitativo, si la reacciónse efectúa con diluciones seriadas.
2.1.2.2. HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA.
Cuando en lugar de partículas inertes se usan eritrocitos convenientemente tratados (hematies de carnero tanizados), como soporte de los Ag (hematies sensibilizados), se denomina HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA (HAI). Se efectúa en placa de microtitulación, con diluciones seriadas de los sueros y la lectura es similar a la de laaglutinación directa.
Esta prueba es un desarrollo directo de la prueba de Coombs que se usa para determinar Ac contra Ag de la superficie de los eritrocitos.
- PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA: detecta Ac contra el Ag Rh en la madre gestante.

- PRUEBA DE COOMBS DIRECTA: detecta la presencia de IC sobre la superficie de los eritrocitos del recién nacido.

2.1.3. INHIBICIÓN DE LA HEMAGLUTINACIÓN.Una variante es la INHIBICIÓN DE LA HAMAGLUTINACIÓN (IHA), en la que los posibles Ac existentes en la muestra problema son neutralizados previamente, por lo que la lectura de resultados se interpreta en sentido contrario a la hemaglutinación:
- REACCIÓN POSITIVA: presencia de botón.
- REACCIÓN NEGATIVA: aparición de velo.
Esta técnica se usa para diagnosticar microorganismos que por sí solosson capaces de aglutinar glóbulos rojos, como el virus de la rubéola. Sí en el suero del enfermo hay Ac contra el virus de la rubéola, se produce un bloqueo de los virus y se inhibe la aglutinación. La ausencia de aglutinación se interpreta como POSITIVO, porque hay Ac contra el virus de la rubéola.
2.2. REACCIONES DE LISIS.
Las reacciones inmunológicas que utilizan el complemento se basan en sucapacidad lítica. Esta capacidad lítica esta disminuida en enfermedades autoinmunes, deficiencias congénitas y enfermedades infecciosas.
La formación de IC conlleva en muchos casos la fijación de complemento. Esta fijación no es visible, pero puede revelarse al manifestarse alguna de las reacciones biológicas del complemento (hemolisis).
2.2.1. REACCIONES PARA MEDIR EL COMPLEMENTO.
2.2.1.1....